📰 研究进展
重组油菜 napin 在毕赤酵母中的表达
全球替代蛋白需求持续攀升，高效生产平台成为研究热点。本研究利用毕赤酵母（*Pichia pastoris*）建立重组 napin（rNapin）的可规模化生产工艺，并与菜籽来源的天然 napin（cN...
毕赤酵母重组蛋白生产的新替代分泌信号序列评估
分泌信号序列是重组蛋白胞外生产的关键分子元件。本研究从乳酸克鲁维酵母、马克斯克斯鲁维酵母和多形汉逊酵母中分离了α-交配因子与PIR两类分泌信号序列，在毕赤酵母中测试其驱动α-淀粉酶和木聚糖酶分泌的效率...
污水污泥水热碳化液相产物经工程化解脂耶氏酵母合成微生物脂质
污水处理厂产生的大量污泥既是环境负担，也是潜在资源。本研究以水热碳化（HTC）技术处理污水污泥，将其液相副产物（HTC-AP）作为解脂耶氏酵母（*Yarrowia lipolytica*）的发酵基质，...
基于HiBiT/LgBiT的单细胞平台
重组人透明质酸酶PH20（rHuPH20）在毕赤酵母中分泌水平偏低，传统筛选策略周期长、通量低。本研究构建了基于HiBiT/LgBiT互补系统的单细胞表面展示检测平台，以表面荧光作为分泌能力的替代指标...
毕赤酵母蛋白酶表征及其在改善猪肉干品质与贮藏稳定性中的应用
肉干类产品的风味形成与蛋白质降解密切相关，而内源蛋白酶活力有限、易受抑制，外源蛋白酶成为提升产品品质的有效策略。本研究系统表征了毕赤酵母（*Pichia pastoris*）来源蛋白酶的酶学特性，将其...
口服重组毕赤酵母CXCL20a抑制草鱼GCRV感染
草鱼呼肠孤病毒（GCRV）给草鱼养殖业造成严重经济损失。本研究通过密码子优化、多拷贝整合及诱导条件优化，在毕赤酵母中实现了草鱼趋化因子CXCL20a的高效胞内表达（Pp-C20a）。结果显示，300 ...
谷胱甘肽代谢与自噬在NAC
毕赤酵母表达系统是生产药用蛋白的优良平台。N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）处理可提高重组蛋白产量，但其作用机制尚不明确。本研究揭示了NAC通过调节谷胱甘肽（GSH）代谢减少其消耗、提高总GSH水平及G...
基因拷贝数与伴侣蛋白过表达协同优化毕赤酵母重组凝乳酶生产
凝乳酶是干酪工业中关键的牛奶凝固酶。本研究以毕赤酵母KM71为宿主，利用乙醇诱导型突变ADH2启动子表达牛凝乳酶基因，系统考察1–4拷贝基因剂量效应，并在此基础上共表达蛋白质二硫键异构酶（PDI）伴侣...
优化毕赤酵母蛋白分泌
毕赤酵母（*Pichia pastoris*）是广泛应用的外源蛋白分泌表达宿主。本研究以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）为报告蛋白，系统比较了来自*Saccharomyces cerevisiae*、*...
扩展链霉菌无细胞蛋白合成系统：提高产量，拓宽应用谱系
无细胞蛋白合成（CFPS）是合成生物学的重要工具，但链霉菌来源的CFPS系统产量长期偏低。本研究通过增加细胞提取物浓度和优化裂解方式（超声替代高压匀浆），将模式蛋白EGFP的批量合成产量从约50 μg...
自动化模块化组装：由体外
细胞-free蛋白合成系统（CFS）是合成生物学的重要工具，但传统重组系统（如PURE系统）成本高昂、制备繁琐。本研究开发了i-POPFLEX系统——由34个翻译组分和分裂T7 RNA聚合酶组成，全部...
分裂T7开关介导的无细胞蛋白合成系统用于靶核酸检测
无细胞蛋白合成（CFPS）系统在核酸检测领域展现出巨大潜力，但传统toehold开关策略存在泄漏翻译、检测限高（约30 nM）及序列筛选繁琐等瓶颈。本研究开发了一种基于分裂T7启动子的新型CFPS检测...