📖 实验教程

做qPCR扩不出来，回看RNA凝胶电泳只有一条拖尾smear，28S和18S两条带几乎看不见——这大概是分子实验里最让人血压飙升的场面。RNA降解的元凶就两类：内源RNase没被抑制住，外源RNase...

做发酵的人，谁没追过泡沫？开了大半夜发酵，第二天推门一看，排气管往外喷料液，地上一滩黄汤。你说消泡剂也加了，搅拌也没停，怎么它还逃？本文直接给你一套排查路径——从低级错误到系统联控，再到进阶疑难，一次...

你跑了一下午梯度，主峰后面拖条长尾巴，收集管里全是稀稀拉拉的“废液”，蛋白纯度不过关，重复性也崩了。别急着怪柱子，脱尾这件事，九成有规律可循。本文从新手上路的低级错误，到盐梯度斜率的系统性排查，再到罕...

你切胶切得手抖，洗脱液加得小心翼翼，结果Nanodrop一测，30 µL洗脱液里DNA浓度低到让人怀疑人生。胶回收效率低，八成不是试剂盒坏了，而是操作细节崩了。这篇教程只讲一件事：怎么从“回收失败”一...

盼着氮源耗尽后次级代谢产物哗哗出来，结果等来的却是菌体不长、产物零蛋，或者干脆提前自溶？你大概率不是第一个踩坑的人。氮源限制诱导次级代谢，这套机制从链霉菌到真菌都适用，但“限制”两个字在实际操作里远没...

养细胞最怕的不是长得慢，是培养基里飘起一层白色絮状物。肉眼可见的浑浊，镜下全是结晶，细胞在里头苟延残喘。你以为是培养基污染，过滤一遍照旧，换一瓶新批号还是不行，最后把血清、谷氨酰胺、抗生素全换了一遍，...

冻存一批细胞，复苏后存活率不到50%，甚至大片飘白。你大概率第一时间怀疑液氮罐出了问题，或者冻存液过期了。但真正的元凶，往往藏在那条你没画过的降温速率曲线里。这篇教程从低级错误开始，带你逐步拆解冻存复...

你盯着屏幕上的pH值从6.80慢慢飘到7.15，培养液颜色也变了。补碱泵频繁启动，DO曲线跟着抖动，整批发酵数据全乱了。pH电极漂移，是发酵罐最磨人的问题之一。校准液温度补偿没做对，更是新手重灾区。这...

做酶切，最烦的不是没条带，而是条带比预期多。多出来的那条，位置不对，亮度还忽高忽低。你换了酶，换了缓冲液，结果还在。别急着怀疑酶失效，大概率是星号活性。而星号活性背后，最常见的推手是甘油浓度超标。

搅拌转速已经加到上限，溶氧还是拉不回来。你盯着DO曲线，心里明白：不是转速不够，是氧传递系数（KLa）掉了。但问题是——它为什么掉？你该先查哪？这篇文章给你一套直接能用的排查逻辑：先排除低级错误，再按...

做无细胞表达最气人的事是什么？一管反应做下来，SDS-PAGE结果干干净净，目标条带跟蒸发了似的。你换了温度，加了镁离子，甚至把模板量翻了三倍，产量纹丝不动。

发酵罐的KLa值掉了一半，溶氧值怎么补都上不去，菌体浓度卡在OD600=15再也涨不动。你检查了通气量、搅拌转速、温度、pH，全部正常。问题出在哪？大概率是挡板——这个罐内最简单却最容易被忽略的部件。...