📖 实验教程

产酸期pH一路掉到5.0以下，菌群明显被抑制；或者产甲烷阶段pH怎么调都稳不住，挥发酸越积越多。这类问题在实验室里太常见了。本文围绕“产酸抑制+两阶段pH调控”这条主线，从低级错误、分流程系统排查到进...

挑完单克隆，跑完PCR，一板96个孔全是野生型。或者切割效率明明80%， knock-in阳性率却是0。这种时候别急着换细胞、换试剂盒，大概率是某个具体环节出了岔子。这篇教程按"转染前设计—递送—检测...

做流式的人几乎都被 Annexin V 坑过一次：对照组没处理，结果早期凋亡率报了 25%；处理组和对照组几乎重合；或者复孔之间差了一倍。心里第一反应是“药物没效果”，但大概率不是生物学问题，而是样本...

做包涵体复性最气人的不是没产物，是透析袋里一夜之间长出一管絮状物，上清里啥也没剩。更憋屈的是蛋白明明溶着，测活性却接近零——二硫键配错了。这篇带你把这两类坑逐个捋清，从低级错误到GSH/GSSG配比、...

跑CE的人最怕什么？同一批样品，昨天12.3 min出峰，今天12.8 min，连跑五针RSD越跑越大。校准品还在范围内，峰形却开始拖尾。你换柱子、换电压，问题还在。大概率不是仪器坏了，是缓冲液更新和...

Ct值看着还行，扩增曲线却爬不起来，平台期低得可怜，复孔还一高一低。这板数据到底能不能用？别急着复测，也别直接判样本阴性。平台高度反映两件事：反应攒出了多少产物，仪器读到了多少荧光。问题可能藏在模板、...

做凋亡双染，最让人头疼的不是染不上，是补偿调了半天，象限门还是歪的。FITC单染管在FL2冒信号，PI单染管在FL1拖尾巴，样本一上机早期凋亡比例忽高忽低。你以为是抗体的问题，大概率是补偿设置或者样本...

跑完层析，峰形看着挺漂亮。一跑SDS-PAGE傻眼了——目标条带旁边总趴着几条顽固杂带。合并收集吧，纯度不够；不合并吧，收率太低。目标峰与杂峰重叠这事，从样品前处理到洗脱梯度，每个环节都可能埋雷。这篇...

丁醇发酵跑完48 h，OD不低，残糖还剩20 g/L，丁醇只有4 g/L？别急着换菌株。氮源种类没筛对，pH和灭菌方式会先把产量拖垮。这篇按“先查低级错→再按流程拆→最后啃疑难”走，给具体参数和判断动...

做基因回路噪声分析，最怕的就是单细胞荧光数据跑出来一团乱麻：CV值跟文献差三倍，双峰分布凭空消失，或者噪声压根不随表达量变化。你盯着显微镜和Excel表，怀疑人生。问题多半不在"噪声理论"上，而是藏在...

膜蛋白提取中最令人头疼的地方在于：细胞培养良好，裂解顺利，但 Western blot 结果中的目标条带却非常淡。九成以上的问题出在去垢剂体系和膜回收这两步，而不是抗体。下面按实验流程，从细胞破碎、膜...

内参跑着跑着就飘了，Ct值板内差1.5个循环，板间差3个循环，重复孔像随机数。你怀疑RNA降解、怀疑引物、怀疑人生，其实大概率是参比荧光没校正好。本文从加样台到数据分析，把ROX校准和内参波动的排查路...