📖 实验教程

菌种丢进罐里，等了两小时没动静，pH没变化，OD值趴着不动。急不急？发酵罐每分钟都在耗电，你的排产计划在倒计时。更难受的是，你心里没底——这到底是菌种不行，还是接种量没给够？别急着重新摇瓶。这篇教程专...

发酵罐的KLa值掉了一半，溶氧值怎么补都上不去，菌体浓度卡在OD600=15再也涨不动。你检查了通气量、搅拌转速、温度、pH，全部正常。问题出在哪？大概率是挡板——这个罐内最简单却最容易被忽略的部件。...

培养基颜色变了，细胞不长了，实验又要重来。pH漂移是最隐蔽的始作俑者。你以为是细胞问题，其实是缓冲体系崩了。别急着换血清或重做细胞，先按下面步骤排查。覆盖HEPES配制、培养箱环境、操作细节和进阶疑难...

质粒酶切这步，卡住过多少人？你切了2小时，跑胶一看，要么一条带都没断，要么出现了四五个“幽灵条带”。该换的试剂换了，该查的protocol翻了，问题还在。更烦人的是，胶上的片段大小和预期完全对不上，你...

免疫共沉淀（Co-IP）是验证蛋白互作最常用的手段。可你兴致勃勃跑完WB，曝光出来一大片非特异条带，目标蛋白却淹没在背景里。更气的是，重复两次，结果依旧“雪花一片”。别急着换抗体。非特异结合大多是操作...

转化做完了，平板一开，空白一片——连个单克隆都没有。先别急着怀疑人生，更别直接扔掉。这种情况八成不是连接酶“偷懒”，而是你某个环节踩了坑。这篇教程按“低级错误→系统排查→进阶疑难”三层递进，带你用2小...

做PI单染流式细胞术测细胞周期，结果一片乱？G1峰没了，S期高得离谱，G2/M后面拖个诡异小峰？别急着怀疑流式仪，也别急着怪PI浓度。八成问题出在固定这一步。固定时间太短、太长，或者固定液加得太暴力，...

做蛋白纯化最怕什么？蛋白出来了，内毒素超标。去内毒素的层析介质又不便宜，可偏偏它有时候就是“不干活”。你换了缓冲液、再生的次数也不少了，内毒素还是卡在临界值。别急着怪介质质量。大概率是你的操作流程里埋...

发酵罐尾气里的CO2浓度，是判断菌体代谢活性的“体温计”。但体温计也有说谎的时候——质谱联用系统测出来的CO2数值忽高忽低，和溶氧趋势对不上，呼吸熵算出来甚至大于2。你先别慌，大概率不是发酵出了问题，...

养菌子这事，最磨人的不是目的蛋白不表达，而是菌压根不给你好好长。OD600卡在0.4不动，或者加完诱导剂两小时直接开始“自尽”——你不是一个人踩过这个坑。这篇教程专门拆解菌体生长慢和诱导剂浓度这两个纠...

跑核酸电泳，最糟心的是marker先出问题。条带弥散、亮度不均、甚至大片段不见了。你反复换样品、加样，结果还是一样。别急着怪试剂，大概率是缓冲液在坑你。本文从低级错误到系统原因，再到进阶疑难，一步步教...

熔解曲线多峰，几乎是每个做qPCR的人都踩过的坑。你以为产物很特异，结果一跑熔解曲线，两个峰甚至三个峰，直接心凉。别急着重做实验，也别怀疑仪器坏掉。大概率是退火温度没选对，或者引物、体系里藏着猫腻。这...