📖 实验教程

柱压正常、峰形也漂亮，就基线一路往上爬，跑个30分钟梯度能从0.5 mAU飘到15 mAU。你换了新柱子、洗了检测池、重启了软件，问题还在。别急着报修检测器。大概率是流动相里的溶解气体在搞事。这篇把脱...

建完RNA-seq文库，Bioanalyzer一跑，主峰卡在150-180 bp。你要的300 bp呢？测序回来比对率低，转录本拼不出来，融合基因全是假阳性。别急着换试剂盒。大概率是流程里某个环节把长...

细胞培养最怕支原体污染，更怕检测假阴性。明明细胞状态下滑，PCR却白板。问题多半出在样品富集环节。本文从取样、富集到DNA提取，拆解假阴性的常见坑，给你能直接上手的排查步骤。

做qPCR的人都有过这种时刻：板子跑完，R²=0.998，看着挺美，一点开斜率是-3.9，效率80%。样品Ct倒是齐整，可你心里清楚，这板数据拿去定量，低表达基因的差异全得打折。斜率-3.32才是10...

超滤浓缩做到一半，滤液里全是你的蛋白？或者浓缩速度慢得像滴水，30分钟才下去200 μL？十有八九，问题出在截留分子量（MWCO）上。MWCO选错、用错、判断错，是蛋白浓缩翻车的高频原因。今天这篇把从...

做原代神经元、干细胞、内皮细胞的人，多少都经历过这个崩溃瞬间：辛辛苦苦包被了板子，接种下去4小时，镜下细胞还是圆滚滚漂着，贴壁率不到30%。你怀疑细胞死了？台盼蓝染色活率95%以上。问题大概率出在包被...

你的罐子是不是也这样：设定μ=0.15 h⁻¹，结果OD600爬到30就卡死；碳源一减再减，碳氮比从20:1掉到6:1，菌体还是一副吃不饱的样子。别急着加酵母提取物，也别急着升温。这篇教程按“低级错误...

做重组蛋白，最让人挠头的不是没条带，是条带弱得跟背景一样。你换了载体、调了IPTG、跑了三次SDS-PAGE，目标带还是若有若无。多数人第一反应是"载体不行"，然后重新克隆，白干两周。实际上，表达量低...

做His标签蛋白纯化，洗脱峰宽得像草原。收集管从A1到B10都是目标蛋白，浓度却低得可怜。你跑SDS-PAGE发现条带没错，但产量惨不忍睹。洗脱体积过大、峰形拖尾，问题多半出在柱子、样品或洗脱条件。本...

做大肠杆菌表达，好不容易把包涵体洗出来、溶解掉，一到复性这步，溶液又变浑浊了。离心一看，沉淀比复性前还多。你盯着离心管，心里只有一句话：白干了。别急，复性沉淀是原核表达里最常见的翻车点之一，大概率不是...

连接过夜，转化涂板，第二天一看——平板上的克隆用一只手数得过来，或者清一色是空载自连。这种崩溃很多人都经历过。问题大概率不在连接酶本身，而在插入片段和载体的摩尔比、片段纯度、载体自连这三件事上。下面按...

酶切、去磷酸化、连接、转化——跑完一整轮，第二天早上板子上密密麻麻全是菌，挑十个克隆去测序，九个是空载。这种崩溃你大概遇到过。空载背景高，八成不是连接酶的问题，而是载体根本没被磷酸酶处理干净，或者酶切...