📖 实验教程

做纯化最怕的不是没挂柱，而是目的蛋白明明洗下来了，峰却宽得像“山体滑波”，收集管里每一管都有点蛋白，抗体、酶活、纯度全面拉低。尤其刚换缓冲液配方后出现这种情况，十有八九是缓冲液在作怪。这篇教程从低级错...

酵母发酵中，乙醇浓度一高，葡萄糖流加就“喂不进去”——残糖忽高忽低、乙醇产率上不去、发酵周期越拖越长。这背后不是单一因素，而是乙醇抑制、葡萄糖效应和流加策略三者纠缠的结果。本文从低级错误到高级疑难，按...

做qPCR最怕的不是没Ct值，而是曲线“长不高”——扩增曲线平台期本该平平稳稳停在ΔRn=1.5左右，结果压在0.3甚至0.1就趴窝，荧光强度上不去，数据方差还特别大。你换过引物、调过模板，问题依然在...

做Northern/Southern blot最烦什么？不是杂交没信号，而是明明strip过了，膜上还留着上一轮的“鬼影”——曝光一压，旧信号神出鬼没，新结果根本没法看。你换了新探针、延长了洗膜时间、...

做细胞实验的同学，谁没被支原体吓过几回？你辛辛苦苦养了一个月的细胞，送去检支原体，PCR结果出来——阳性。再查一次，又是阳性。可细胞形态明明挺好的，怎么也想不通污染源在哪。更抓狂的是，做了半天对照和复...

做蛋白表达最怕什么？不是诱导后没蛋白，而是**还没加IPTG，菌体先“化”了**——OD600不升反降，发酵液变清变稀，瓶壁挂满黏滑的菌膜，离心后沉淀少得可怜。新手第一反应是“菌株污染”，其实多数时候...

电泳图一出来，marker旁边糊成一条黑带，阴性对照的beads上挂满了杂蛋白，目标条带根本没法看——这种Pull-down的非特异结合问题，几乎每个人都遇到过。别急着换体系，也别怀疑人生，90%的“...

做发酵最怕的不是产率低，而是半夜收到报警：pH异常升高、溶氧（DO）断崖式下跌、OD值不升反降，镜检看到一堆碎片甚至“拉丝”现象——染菌了，或者更棘手，噬菌体爆发了。更崩溃的是，这批货只能整罐报废，车...

做细胞实验最怕什么？不是细胞不贴壁，不是转染效率低，而是你辛辛苦苦配好的培养基，放置两三天后瓶底出现一层白花花的东西。更要命的是，过滤除菌后沉淀还在，你敢用吗？细胞敢用吗？数据敢用吗？别急着扔，沉淀≠...

克隆PCR又双叒叕空跑胶了？阳性率低到怀疑人生，模板、酶、引物挨个背锅，最后发现是引物设计埋了雷。别急着重新设计20对引物，也别把宝贵质粒全搭进去。这篇教程聚焦「克隆PCR引物设计导致的阳性率低」，带...

做蛋白纯化最怕什么？不是目标蛋白没挂上，而是明明上次还能上样50 mg/mL介质，这次只挂上去20 mg就穿透了。你第一反应是“介质不行了”，但直接报废换新？一升介质好几千块，老板的脸比你的紫外吸收峰...

做转染实验最崩溃的瞬间是什么？明明质粒没问题、细胞也养得挺好，但荧光显微镜下一看，稀稀拉拉几个亮点，转染效率不到20%。更折磨人的是，你查了无数篇文献，试了好几种脂质体，结果还是“薛定谔的效率”。别急...