📖 实验教程

做细胞实验的同学，谁没被支原体吓过几回？你辛辛苦苦养了一个月的细胞，送去检支原体，PCR结果出来——阳性。再查一次，又是阳性。可细胞形态明明挺好的，怎么也想不通污染源在哪。更抓狂的是，做了半天对照和复...

做Northern/Southern blot最烦什么？不是杂交没信号，而是明明strip过了，膜上还留着上一轮的“鬼影”——曝光一压，旧信号神出鬼没，新结果根本没法看。你换了新探针、延长了洗膜时间、...

做基因合成片段PCR，最怕碰到GC含量超过65%的模板。条带若隐若现、引物二聚体糊成一片、甚至干脆什么都不出——你以为是酶的问题，换了三种高保真酶还是老样子。别急，这通常不是酶的锅，而是你的反应体系和...

养细胞最怕什么？不是培养基污染发黄，不是血清质量波动，而是支原体——看不见、摸不着、不爆死亡、不飘黑点，却悄悄改变你的实验数据。更扎心的是，你用了清除试剂，传了几代，检测还是阳性。本文覆盖支原体隐性感...

做WB或SDS-PAGE时，最烦的不是没条带，而是条带拖尾——主带下方拖着一条“彗星尾巴”，或者整条泳道背景发糊、条带边界模糊不清。你调曝光、换抗体、加封闭，结果还是老样子。其实拖尾的根源通常不在显影...

搞诱变育种最崩溃的瞬间，不是没突变，而是筛出一堆“突变体”，最后验证时全变回野生型——假阳性！尤其EMS、紫外、亚硝基胍处理过的菌液，涂在筛选平板上密密麻麻长出来，你挑得手软，结果摇瓶复筛全军覆没。问...

细胞划痕实验做出来“花脸”——有的地方已经长满，有的还空着一大片，这种数据根本没法定量。你以为是细胞状态问题，换一板还是这样？其实愈合不均的原因通常很集中，从枪头歪斜到无血清培养基失效，每一步都有迹可...

开篇导语：荧光素酶报告基因实验看似简单——转染、裂解、加底物、读板，但结果忽高忽低、复孔CV值动不动超过15%，甚至同一批样品重复测量趋势相反？别急着怪细胞状态或质粒浓度。这篇教程从移液枪刻度到数据归...

做代谢流分析，最怕的不是后面的质谱误报，而是你在淬灭这一步就已经把真实的代谢状态“洗掉了”。细胞还在呼吸，介质还在转化，你多等两秒，磷酸戊糖途径的中间产物就翻了个倍。今天这篇教程，专门针对淬灭控制这个...

做芽孢染色，最气人的不是芽孢染不上，而是背景里全是红点、绿斑、晶体和碎屑。明明按步骤做了，镜检却像看星空——芽孢淹没在花花绿绿里。新手容易怀疑染液失效或菌种不对，其实九成问题出在涂片、脱色、水洗这些细...

做蛋白纯化最崩溃的瞬间，不是蛋白没挂上柱，而是纯化结束后内毒素检测超标，几天的活儿全白干。尤其对要做细胞实验或动物注射的样品，内毒素必须压到0.1 EU/mL以下。可现实是：你用了去内毒素的亲和树脂、...

转化子长出来了，质粒却“偷偷”丢了；传代几轮后目标条带越来越淡；甚至摇瓶培养后一半菌落没有筛选标记……酵母转化子的质粒稳定性评估，看似只是“传代+点板”的简单活儿，但翻车的细节多到超乎想象。操作没问题...