📖 实验教程

你花三天纯化出蛋白，测内毒素0.5 EU/mL，细胞一加就死。换柱子、换缓冲液，结果没变。别急着怀疑人生。内毒素去除是个系统工程，从水、器皿、介质到检测，任何一环都可能是漏点。本文按实验流程拆成三步：...

做CE的人最烦看到什么？峰前面拖个小坡，后面陡得像刀切，积分面积飘，重复性还差。你以为是柱子坏了，其实大概率是样品基质、进样量或缓冲液在捣乱。这篇按“先查低级错、再分流程排、最后啃疑难”的顺序，把毛细...

昨天转化还长满板，今天同样操作只剩个位数菌落。你盯着那管感受态，心里发毛。冻融一次就废了？别急着扔。这篇教程把感受态冻融后转化率下降的坑从低级到进阶全捋一遍。每个原因都给你判断方法、验证手段和具体操作...

跑完一轮GUIDE-seq或靶向深度测序，打开报告一看——候选位点几百个，验证下来全是假阳性；换个样本，明明细胞表型变了，却一个脱靶都查不到。这种"两头堵"太常见。脱靶评估从来不是单一步骤的事，它横跨...

做了半天转化，平板一过夜就密密麻麻。挑十个克隆，九个是空载体，剩下一个测序还突变。别急着怀疑连接酶。背景克隆有固定来源，从载体线性化到涂板筛选，每一步都能漏。本文按实验流程拆成6个模块，给你判断依据、...

RNA-seq文库QC亮红灯，是不是第一反应想重做？先别急着扔样本。Agilent 2100上出现132 bp杂峰、Qubit浓度0.8 ng/µL、qPCR定量比Qubit低5倍——这些信号背后原因...

你跑完胶，切下目标条带，回收浓度却只有5 ng/µL？或者用低盐洗脱后A260/280漂亮，一连接就掉坑。问题常常不在试剂盒，而在切胶、溶胶、洗涤、洗脱里的某个小动作。本文按“先查低级错，再拆流程模块...

发酵罐一开，质谱基线慢慢往上爬，CO2和O2曲线跟着漂，补料决策全乱。别急着换灯丝，也别先叫工程师。尾气MS基线漂移，多数不是主机坏了，而是取样、真空、离子源、校准这些环节在变。本文按“先查低级错误，...

做多片段拼接，最崩溃的不是没克隆，而是长了一堆菌落，菌落PCR有条带，测序一看全乱套。要么片段缺失，要么接反，要么到处是点突变。你反复检查引物、重做PCR、换酶，时间全耗在重复劳动上。这篇教程把多片段...

高密度发酵最怕的不是染菌，是噬菌体。细菌污染能看到浑浊、异味，噬菌体污染常常只给你一个信号：OD600 冲到 20-100 后突然掉，pH 上冲，DO 飙升，泡沫变清。等你发现，整罐已经裂解。本文按“...

跑完SDS-PAGE，洗脱峰一泳道全是带。目标蛋白在，杂蛋白也在，还不少。Ni柱、离子交换、分子

切完胶、洗完柱子、测完浓度，一切看起来都对，结果一酶切，琼脂糖凝胶上只有一条原带。回收率挺高，酶也是新买的，缓冲液也没问题，问题到底出在哪？这种情况九成不是酶失活，而是回收过程里带进了抑制物，或者你的...