📖 实验教程

传了10代，选择板上菌落掉了两个数量级。是真丢了质粒，还是你铺板铺错了？质粒稳定性评估看着简单——YPD传代、铺板、数菌落。但每一步都能埋雷。有人测出90%丢失率，换个方法一测只有3%。这篇把酵母转化...

未加IPTG，OD600却从0.8掉到0.3，菌液发黏、泡沫一层，谁遇上都头大。诱导前自溶不是玄学。它大概率是种子、溶氧、pH、抗生素或泄漏表达在作怪。下面按“先抓低级错，再按流程拆，再看疑难”的顺序...

酶切后胶回收只剩一抹，连接过夜转化还是零克隆？别急着换酶。十有八九是体系、比例或纯化步骤出了岔子。这篇按“先查低级错，再拆实验流程，最后啃疑难”的顺序，把酶切连接效率低的常见坑一次讲清。覆盖双酶切、去...

辛辛苦苦转染两天，收病毒、超滤、感染，结果滴度只有10^5 TU/mL，对照组还亮着，实验组一片黑。别急着换试剂盒，八成问题出在你没注意的细节上。这篇教程按“低级错误→流程分模块→进阶疑难”三层递进，...

磁珠法提取的痛，基本都长一个样：A260/280看着还行，qPCR却压不出信号，Ct值比标准品晚好几个循环。抑制物残留就是这么回事——乙醇、胍盐、蛋白、多糖，浓度不高，但足够让Taq酶和逆转录酶罢工。...

做包涵体复性，最崩溃的不是没表达，是透析袋里飘满絮状物。回收率不到10%，电泳连条带都看不到。你以为是蛋白不争气？大概率是缓冲液或操作踩了坑。本文覆盖从低级错误到进阶疑难的全部排查路径，按实验流程一步...

你跑完NTA颗粒数爆表，WB却全是白蛋白？超离管底一坨黄褐色，重悬后NTA主峰跑到300 nm？EV纯度上不去，下游测序、电镜、功能实验全白做。别急着换试剂盒。这篇教程按“先查低级错误→再走流程排查→...

摇瓶跑了5天，多糖只有0.9 g/L，隔壁组2.6 g/L。菌丝球挺大，糖不涨。别急着换菌株。多数问题出在种子、pH、溶氧、补料和检测这5个环节。下面按流程拆开，每个原因给判断、验证

跑完SDS-PAGE，一抗二抗孵完，胶片一片空白，或者只有最前面几条带隐隐约约——这种崩溃你肯定经历过。转膜这步看起来简单，却是WB里最容易翻车的环节。下面按“先看低级错误，再分模块系统查，最后啃硬骨...

转染做了三四次，GFP阳性率还不到10%，细胞先死一半。你以为是脂质体不行？大概率是某个小步骤把复合物毁掉了。脂质体转染效率低，原因从细胞状态、DNA纯度、脂质体/DNA比例，一路排到换液时机和检测时...

诱变选育最磨人的一步不是诱变，是筛出来的"阳性"一复筛全没了。平板上抗性菌落长得漂漂亮亮，转接液体摇48小时，OD600跟野生型差不到0.05。你开始怀疑手法。别急，大概率是筛选体系本身漏了。这篇按诱...

跑完SDS-PAGE一看，小分子量区域一片弥散，目标条带糊成拖尾。抗体没问题，样本也没坏。大概率是提取过程中内源性蛋白酶把蛋白切了。降解这事不挑人，新手老手都会踩。本文从操作细节、试剂配制、设备参数、...