📖 实验教程

你的毕赤酵母又诱导了48小时，SDS-PAGE还是空的？甲醇加了，OD也涨，目标蛋白就是不见影。慢诱导不等于失败，但拖过72小时，杂蛋白和降解会一起上来。这篇按“先排低级错→再拆流程→最后啃硬骨头”走...

发酵罐下午还长得好好的，晚上 OD 直接腰斩，泡沫顶罐，pH 自己往上走。你以为是普通杂菌？大概率是噬菌体。它传播快，一次爆发能停掉整条线。本文按接种、灭菌、空气、补料、过程监控五段排查，给你现象、原...

同一株菌，上周批效价 8 g/L，这周只有 5 g/L。pH 曲线像两条路。你盯着发酵罐，其实问题常在种子。种子活力不稳，接种后延滞期差 4–8 h，单位、副产物、耗糖全跟着飘。本文按“先查低级错误，...

同一批样品，别人跑出来是单一条带，你的却糊成一团？糖谱图上该出现的峰没出现，不该有的小峰一大堆？糖基化异质性分析难就难在“异质”两个字——同一个蛋白上挂着几十种糖型，任何一步参数漂移都会让结果变形。这...

养了三个月的细胞，突然长得慢、贴壁差、转染效率掉一半。你做了支原体检测——阴性。换血清、换培养箱、加大血清浓度，全没用。问题大概率不在检测本身，而在你怎么取、怎么提、怎么判。这篇教程把支原体隐性检测的...

买回来的蛋白冻干粉，加完水一看，浑浊了。或者刚复溶是清的，放4°C过夜，管底一层絮状物。这大概是重组蛋白用户最头疼的开局。本文按“低级错误→缓冲体系→蛋白自身→进阶疑难”的路径，把复溶沉淀的常见原因和...

转染后6 h细胞变圆，24 h飘一半，GFP没几个？别急着怪细胞。高毒性常被误判成“转染效率低”。质粒纯度、内毒素、DNA/试剂比例、细胞状态、目的基因本身，任何一环都能让皿里横尸遍野。本文按从低级错...

做发酵的人都懂那种绝望：凌晨三点，罐压飙升，排气口开始吐白沫，料液顺着尾气管道往外爬。半小时后罐内液位掉了一半，取样一看——染菌了。泡沫问题从来不是小事，它直接吃掉你的产量，还捎带染菌风险、下游纯化难...

挑了一板白斑，菌落PCR全亮，测序却全是空载或非特异。这不是运气差，是排查顺序错了。蓝白斑只能初筛，菌落PCR也只是初筛。本文按转化平板、引物设计、模板制备、PCR体系、电泳判读、测序验证拆开讲，给你...

同一块板，前5分钟OD 0.8，10分钟后变成0.95。标准曲线昨天R²=0.999，今天掉到0.97。别急着换抗体。漂移不是玄学。酶标仪信号漂移常来自预热不足、板底气泡、光路脏、温控波动和校准失效。...

跑胶两小时，结果条带弯成月牙——中间快、两边慢，这就是"微笑"条带。定量算不准，切胶回收挑错片段，重复实验白做。别急着怀疑样品降解，大概率是电泳系统在闹脾气。下面按制胶、缓冲液、电泳条件、上样四大模块...

跑Ni柱最崩溃的不是没峰，是峰宽得像土坡。A280一路拖尾，收集管一管接一管，SDS-PAGE却只有一点目标蛋白。目标浓度上不去，还混着杂带。别急着换柱子，也别立刻加咪唑。这篇把His标签蛋白洗脱峰展...