来源：发酵产物萃取分层难破乳剂选择（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space
发酵液加乙酸乙酯，1:1 混匀、涡旋 30 秒、静置半小时——底下是水相，上面是溶剂相，中间夹着一层白花花的“奶盖”，怎么都不动。这不只是难看。产物被包裹在界面层，回收率掉三成是常有的事。别急着往瓶里倒破乳剂，八成原因在上游。下面按发酵液预处理、溶剂体系、混合强度、破乳剂筛选、温度离心五个模块拆开，给你一条能照着做的排查路径。
第一步：先快速排查低级错误
新手出问题，往往先卡在以下四个点。逐项检查，不要跳过。
1. 没去除菌体就直接萃取。全细胞蛋白和多糖在界面形成稳定膜。解决：发酵液先 8000×g、4°C 离心 10 分钟，或过 0.22 µm 滤膜，取上清再萃取。
2. 溶剂体积比随意。乙酸乙酯:水相低于