细胞冻存复苏活力低方案

来源：细胞冻存复苏活力低方案（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space

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冻了一管，救回来一半？台盼蓝一染，活率不到50%，贴壁稀稀拉拉。别急着怪细胞娇气。冻存复苏是条链，断在哪一环都有信号。本文从冻存前状态、冻存液、降温、储存、复苏到接种，按流程给你8步排查，附具体参数和验证动作。照着做，大多数活力低都能定位。

第一步：快速排查低级错误

1. 细胞冻存前汇合度超过90%或血清饥饿太久？别冻。传代后24-48h，70-80%汇合，活率>90%再冻。

2. 冻存液室温配好放半天？DMSO常温毒性大。用完全培养基:FBS:DMSO=7:2:1，DMSO终浓度10%，4°C预冷30min，冰上15min内分装。

3. 直接扔-80°C