来源：细胞培养基沉淀析出过滤（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space
细胞培养基刚配好就浑浊，过滤时注射器推不动，滤完放两天又出现沉淀。这些问题不解决，细胞状态直接崩。本文按配制、pH、过滤、储存四条线，给你可落地的排查动作，附具体参数和验证方法。别急着扔培养基，先按下面走一遍。
第一步：快速排查低级错误
1. 水用错了。 拿自来水或普通去离子水配培养基，钙镁离子和杂质直接超标。换18.2 MΩ·cm超纯水，现取现用。
2. pH没调就过滤。 pH冲到7.8，磷酸钙马上析出。用1 M HCl或1 M NaOH边搅边调，回到7.2-7.4再过滤。
3. 滤膜选错。 用了硝酸纤维素或PVDF，培养基成分被吸附，还容易堵。换0.22 µm PES膜，低蛋白吸附，流速稳。
4. 没做预过滤。 颗粒直接怼0.22 µm，膜孔瞬间堵死。先过0.45 µm PES，再上0.22 µm除菌。
第二步：分维度系统排查
模块1 配制与溶解
1. 盐类加入顺序乱。
现象： 配完立刻浑浊，底部有白色细沙。
原理： 钙、镁和磷酸盐局部浓度过高，生成磷酸钙沉淀。
解决： 先加超纯水，溶MgSO4和CaCl2，最后加磷酸盐。每种完全溶解后再加下一种，搅拌转速200 rpm。
验证： 取10 mL配好的液体，4°C静置24 h，看管底有无颗粒。
2. 碳酸氢钠与CO2打架。
现象： 培养瓶放进CO2培养箱后，出现白色结晶。
原理： NaHCO3遇CO2平衡，局部pH升高，CaCO3析出。
解决： NaHCO3单独配7.5%母液，0.22 µm过滤后按2.2 g/L加入。调pH至7.2，再过滤。
验证： 取5 mL放37°C、5% CO2培养箱24 h，观察是否浑浊。
3. 血清或添加剂析出。
现象： 加FBS后出现絮状物，像棉丝。
原理： FBS反复冻融，脂蛋白变性聚集。
解决： FBS放4°C缓慢解冻，2000×g离心10 min，0.45 µm过滤，再按10%加入。
验证： 取1 mL培养基，12000×g离心5 min，看管底有无沉淀。
模块2 pH与温度
4. pH偏高。
现象： 培养基呈微乳光，不是完全透明。
原理： pH>