📖 实验教程

FFPE样本做DNA，最怕三件事：提不出来、提出来全是短片段、修复后还是扩增失败。你明明按试剂盒走了，qPCR却到35个循环才起跳，琼脂糖胶上只有一团<500 bp的弥散。别急着换试剂盒。问题大概率藏...

细胞培养箱里那点支原体，清了三周，PCR一测又亮了。换药、加量、再清，还是反复。问题大概率不在药本身，而在轮换策略、检测时点和操作细节。这篇教程按“先查低级错误→再分流程排查→最后啃硬骨头”三步走，把...

做蛋白透析，最怕打开透析袋一看，里面全是絮状沉淀。你明明按文献换了缓冲液，pH也调了，蛋白就是不给面子。其实90%的透析沉淀都跟pH和离子强度的梯度设置有关。这篇教程按「透析前-透析中-透析后」三步走...

前体补加是链霉菌次级代谢发酵的常规操作。可你兴冲冲补了丙酸钠，效价纹丝不动，菌体还提前自溶了。别急着换菌株。大概率是补加策略、前体毒性或代谢流向出了问题。这篇教程按“低级错误→系统排查→进阶疑难”三层...

你的酵母表面展示是不是又没信号？流式图上主群右移一点点，甚至和空载体分不开。别急着怀疑质粒，八成是诱导环节掉了链子。这篇教程从低级错误到进阶坑，按实验流程拆解Aga1p/Aga2p系统的展示效率问题，...

平板上一片空白，或者稀稀拉拉三五个菌落——做过转化的人都懂那种沉默。你可能会怪质粒、怪感受态、怪试剂，但 80% 的锅落在"热激"这一分半钟上：温度不准、时间照搬、忘了冰浴复温。这篇教程按实验流程从头...

菌落PCR假阳性最烦人：明明挑了单克隆，电泳却条条有带，NTC也亮。别急着换酶、换引物，大概率是模板残留或气溶胶污染。这篇教程按“先查低级错、再走流程、最后啃硬骨头”的顺序，把取样、裂解、配液、引物、...

你辛辛苦苦把大肠杆菌诱导表达，超声破碎后一看，目标蛋白全在沉淀里。好不容易用8M尿素溶了，一透析又全析出。复性缓冲液换了七八种，活性还是零。别急着换载体。本文按“低级错误→缓冲液配方→进阶疑难”三步走...

你跑完甲基化测序，打开比对报告一看：非 CpG 位点的 C→T 转化率只有 92%。标准在哪？99% 以上。要么整批数据报废，要么下游甲基化 calling 全是假阳性。先别骂试剂盒。转化率低的锅，八...

跑cIEF，最怕的不是没峰，是峰宽到像小山包。pI分不开，重复性还差，你以为是蛋白坏了吗？多数时候，问题藏在两性载体、样品基质和聚焦条件里。这篇按实操流程拆：先查低级错误，再按样品、梯度、涂层、聚焦、...

发酵罐尾气O₂读数突然掉到0，或者一直卡在21%下不来。补料策略乱了，代谢曲线也废了。别急着拆电极。大概率是气路漏了或膜脏了。本文把尾气氧含量异常的排查拆成三步：先扫低级错误，再按气路→预处理→传感器...

圆二色谱测蛋白二级结构，最怕基线一路漂。190-200 nm噪声爆表，样品谱图根本没法看。你以为是蛋白坏了？大概率是氮气吹扫、光路或缓冲液在捣鬼。本文从新手低级错误到进阶疑难，给出直接上手的排查路径。...