来源：细胞转染毒性高质粒纯度（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space
转染后6 h细胞变圆，24 h飘一半，GFP没几个？别急着怪细胞。高毒性常被误判成“转染效率低”。质粒纯度、内毒素、DNA/试剂比例、细胞状态、目的基因本身，任何一环都能让皿里横尸遍野。本文按从低级错误到进阶疑难，给你8步排查路径。覆盖A260/280、内毒素阈值、比例梯度、换液时间点、对照设置。照着做，先保细胞，再谈表达。
第一步：快速排查低级错误
1. 质粒浓度测错。Nanodrop只测1 μL，气泡或残留乙醇会让A260虚高