转染效率低脂质体复合比例

来源：转染效率低脂质体复合比例（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space

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转染效率低，细胞死一片，GFP荧光稀稀拉拉？别急着换脂质体。大概率是复合比例、操作细节或细胞状态出了问题。本文从低级错误到进阶疑难，按实验流程拆解脂质体复合比例相关的排查路径。每一步给现象、原理、解决和验证。照着做，你能把转染效率从20%拉到70%以上。

第一步：快速排查低级错误

1. DNA和脂质体比例算错。24孔板常用0.5-1 µg DNA配1-2 µL Lipofectamine 2000，你如果只加0.2 µL，效率肯定低。解决：按板型查表，24孔板1 µg DNA:2 µL Lipo2000起步。

2. 稀释用含血清培养基。血清蛋白包裹DNA，脂质体复合不上。解决：用Opti-MEM或无血清DMEM稀释，体积各25 µL。

3. 复合时间不对。少于10分钟复合不完全，超过45分钟复合物聚集。解决：室温孵育15-30分钟，到点直接加。

4. 细胞密度不对。低于60%转染效率低，高于90%细胞已接触抑制。解决：转染时融合度70-80%，转染前1小时换新鲜完全培养基。

第二步：分维度系统排查

模块一：DNA质量与浓度

现象：