来源：细胞培养基pH偏酸碳酸氢钠（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space
昨天刚换的液，今天酚红就发黄了。细胞圆缩、贴壁变差、飘起来，你一测pH只有6.8。大概率不是细胞的问题，是缓冲体系塌了。碳酸氢钠这套CO₂/HCO₃⁻缓冲对，靠的是培养箱5% CO₂和培养基里1.5–3.7 g/L的NaHCO₃互相咬合，任意一头错位，pH就往酸里跑。这篇按"低级错误—分维度排查—进阶疑难"三层走，给你一套能直接上手做的动作。
第一步：先别急着换液，查这4个低级错误
1. 培养箱CO₂没开、设错或气瓶空了。 面板显示