来源：单细胞测序空滴率高油压（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space
做10x单细胞，最怕上机后空滴率>95%，细胞却没几个。油压一跳，液滴就乱。别急着换芯片。这篇把油路、芯片、流速、温度、细胞悬液全串起来，给你可照做的排查动作链，附具体压力和验证方法。
第一步：快速排查低级错误
1. 油相管、细胞管、珠子管插错位置？直接看芯片丝印。10x芯片上Oil、Cells、Beads各有入口。插错会让水相冲进油路。解决：按标签重插，换新芯片。
2. 芯片没卡紧或垫片有灰？漏气会让油压上不去，液滴断续。解决：用无尘布蘸70%乙醇擦接口，重新压紧，听到“咔哒”再上机。
3. 油相试剂没室温平衡，有气泡？油里气泡占通道，液滴大小乱跳。解决：油相室温放30分钟，1000×g离心1分钟去泡，别涡旋。
4. 细胞悬液浓度太低或结团？空滴率自然高。解决：台盘蓝计数，活率>85%，浓度调到700–1200 cells/µL，40 µm筛网过滤。
第二步：分维度系统排查
1. 油相压力偏低或波动
现象：液滴生成区油水界面抖动，空滴占比>95%，油滴大小不均。
原理：油压不足，油相流速低于水相，水相不能被稳定剪切成液滴。
解决：在10x控制器上查油压，油相从200 mbar起步，每次加10 mbar，最高到260 mbar。样本压力保持100 mbar。
验证：显微镜下看液滴直径50–80 µm，且单分散。若油压表跳动>5%，检查油管是否