📖 实验教程

NTC孔一起峰，心就凉半截。支原体qPCR假阳性大概是最磨人的一类问题——你明明没加模板，机器却告诉你"有扩增"。别急着怀疑细胞污染，八成是引物二聚体在作怪。这篇按"低级错误→分维度排查→进阶疑难"三...

蛋白浓缩到一半，滤液从滴滴答答变成半天一滴。进压表往上飙，你第一反应是不是换膜包？别急。八成不是膜废了，是污染或操作问题。这篇教程覆盖：低级错误排查、样品前处理、TMP与切向流控制、碱酸清洗顺序、水通...

转化做得挺顺，平板长得也漂亮，挑10个克隆做酶切，9个是空载。你是不是已经开始怀疑连接酶了？先别急着重做。空载多、切不开、条带不对，这三件事根子常常不在同一个环节。这篇按从平板到凝胶的实际顺序，把转化...

跑CHO fed-batch跑到第5天，pH从7.00掉到6.70，碱液罐一天空两回，offline测pCO₂已经80 mmHg。这时候你要是只顾着加碱，CO₂只会被催得更高，细胞密度掉得比pH还快。...

从-80°C冰箱翻出半年前的甘油菌，划板不长、摇瓶OD600上不去、提完质粒浓度只有20 ng/µL……这些坑几乎每个做克隆的人都踩过。别急着怀疑质粒丢了。多数情况是保存和复苏细节出了偏差。下面按"冻...

细胞冻存复苏后活率从90%掉到40%？贴壁慢、碎片多、传代后不长？你怪血清批次，怪细胞娇气，其实大概率是降温速率没控住。慢冻快融谁都听过，但-1°C/min怎么落地、程序降温盒怎么用、液氮什么时候转，...

做重组蛋白的，谁没被标签切除坑过？明明按说明书加了酶，16°C过夜，第二天跑胶一看——底物带纹丝不动，或者切了一点点。你的第一反应可能是"酶失活了"，但大概率不是。这篇教程把标签切除效率低的常见原因拆...

酶切跑胶，本来该是两条干净的带，结果超螺旋纹丝不动，或者切出一堆说不清的小片段。这种情况十有八九不是酶坏了，而是你的体系某一个环节越界了。本文按排查顺序走：先扫低级错误，再按模板、体系、条件、判读四个...

做流式的人大概都遇到过这种事：singlet gate 画得漂漂亮亮，结果一往下看，双联体还是混在目的细胞里。分选出来一培养，克隆率掉一半。做细胞周期更惨，G2/M 峰凭空涨了一截。问题不在抗体，也不...

跑完胶，条带像被橡皮擦蹭过，边缘糊成一片。你第一反应调电压，有时对，有时越调越糟。模糊可能来自制胶、上样、缓冲液、电压、温度、染色任何一环。这篇按“低级错误→流程模块→进阶疑难”走一遍，给你具体电压、...

跑空白梯度也出峰？样品没进，210 nm 就冒小尖峰？别急着换色谱柱。鬼峰大概率藏在流动相、过滤膜、水相和管路里。本文按排查路径讲清：怎么判断、怎么验证、怎么解决。覆盖水相过滤、膜选择、脱气、缓冲盐、...