📖 实验教程

质谱基质效应强样品净化

质谱基质效应强样品净化

同一支标样,纯溶剂里响应百万,一进血清就剩两成。回收率今天 95%,明天 60%。你换柱子、洗源、调离子对,折腾一周没进展。问题大概率不在质谱,在前处理。这篇按取样、沉淀、除脂、SPE、复溶、进样六段...

📅 2026-09-28 分子克隆 蛋白表达 质谱基质效应怎么处理
发酵染菌判定镜检革兰染色

发酵染菌判定镜检革兰染色

发酵罐下午三点pH异常上跳,罐温压不住,你赶紧取样涂片染色。油镜下紫红色短杆一片。判染菌?倒罐?一罐料几十万。可再取一个样,干干净净。染菌判定最怕两件事:把杂质当菌,把真菌漏掉。革兰染色本身只有五步,...

📅 2026-09-27 发酵工程 分子克隆 蛋白表达 发酵染菌判定怎么处理
生物反应器搅拌剪切损伤细胞

生物反应器搅拌剪切损伤细胞

细胞活率突然掉、上清发浑、乳酸飙升,第一反应常是“污染了”。别急着扔罐。搅拌剪切、气泡破裂、微载体碰撞都能造成类似结果。本文从低级错误到放大参数,把排查路径、具体数值和验证动作讲透。你照着做,大概率能...

📅 2026-09-27 细胞培养 分子克隆 蛋白表达 生物反应器搅怎么处理
蛋白标签切除不完全酶用量

蛋白标签切除不完全酶用量

切了一夜,SDS-PAGE一看,前体带还在,酶带都快没了。这种崩溃我见过太多次。你加了酶,控了温,等了16小时,结果跟没切一样。问题大概率不在酶本身,而在用量算错、缓冲液不兼容、位点被埋住这三件事上。...

📅 2026-09-27 亲和标签 酶工程 标签切除不完全酶用怎么处…
测序深度不足文库复杂度低

测序深度不足文库复杂度低

测序回来了,覆盖度图上一片窟窿,重复率飙到40%,Q30还凑合但有效数据少得可怜。你第一反应是不是"送样公司坑我"?先别急着找人背锅。测序深度不足和文库复杂度低,八成出在你自己手上的那几步。这篇教程按...

📅 2026-09-27 测序深 文库复杂 基因文库 测序技术
发酵菌体浓度低溶氧限制

发酵菌体浓度低溶氧限制

做发酵最气人的事,不是染菌,是溶氧曲线一路下滑贴到零,菌体浓度卡在OD600 15死活不涨。你加大通气,没用;你把转速拉满,还是零。问题往往不在"供氧不够"这四个字上,而藏在装液量、补料策略、比生长速...

📅 2026-09-27 发酵菌体 溶氧限制 发酵工程
酶切位点沉默突变引物设计

酶切位点沉默突变引物设计

做克隆想消除内部酶切位点,结果PCR没条带、酶切切不开、测序全是原模板。你可能在设计引物时就埋了雷。沉默突变要改碱基却不改氨基酸,还要恰好破坏酶切位点。这篇教程从引物设计、PCR扩增、DpnI消化到转...

📅 2026-09-27 酶工程 分子克隆 蛋白表达 酶切位点沉默怎么处理
转染细胞毒性高脂质体用量

转染细胞毒性高脂质体用量

做转染最怕第二天早上看板子——昨天还铺得均匀的细胞,今天一半飘了、贴壁的也缩成一团。十有八九,问题出在脂质体用量上。毒性高不一定是脂质体"有毒",更可能是用量、比例、孵育条件某一环踩了线。下面按"先排...

📅 2026-09-27 转染细胞 高脂质体用量 脂质体转染 细胞培养
细胞支原体污染清除抗生素

细胞支原体污染清除抗生素

细胞养着养着状态就崩,PCR一测支原体阳性。加了两周抗生素,看着转阴,停药一周又亮灯。这大概是细胞房里最让人上头的事。别急着扔细胞,也别急着换药。下面按"先查低级错、再拆流程、最后啃硬骨头"的顺序,把...

📅 2026-09-27 细胞支原体 清除抗生素 细胞培养
厌氧发酵产气少培养基还原剂

厌氧发酵产气少培养基还原剂

做厌氧发酵,最让人抓狂的不是不产气,而是"产一点又不多"。瓶子看着有气泡,气相色谱一测,甲烷只有理论值的两成。你换了菌、调了温度、加了底物,产气还是上不去。这时候,八成问题出在你最不当回事的地方——培...

📅 2026-09-27 培养基优化 发酵工程 原剂 厌氧发酵产气怎么处理
HPLC峰形拖尾柱温优化

HPLC峰形拖尾柱温优化

峰拖尾最烦人。方法跑得通,峰却像背了个小尾巴,定量积分一塌糊涂。你换柱子、换流动相、调pH,折腾一天,有时问题就在柱温。这篇教程按“快排低级错误→系统查流程→进阶疑难”走,把柱温怎么影响拖尾、怎么判断...

📅 2026-09-27 分子克隆 蛋白表达 HPLC峰形处理方法
层析柱压升高填料堵塞

层析柱压升高填料堵塞

柱压突然从0.3 MPa跳到1.0 MPa,泵开始报警,流速掉了一半,目标峰还没影子。别急着拆柱。层析柱压力升高,九成是填料间隙被堵住,但堵在哪儿、堵了什么,决定了你冲一冲就能救回来,还是只能重新装柱...

📅 2026-09-27 层析纯化 分子克隆 蛋白表达 层析柱压升高怎么处理
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