同一支标样,纯溶剂里响应百万,一进血清就剩两成。回收率今天 95%,明天 60%。你换柱子、洗源、调离子对,折腾一周没进展。问题大概率不在质谱,在前处理。这篇按取样、沉淀、除脂、SPE、复溶、进样六段...
发酵罐下午三点pH异常上跳,罐温压不住,你赶紧取样涂片染色。油镜下紫红色短杆一片。判染菌?倒罐?一罐料几十万。可再取一个样,干干净净。染菌判定最怕两件事:把杂质当菌,把真菌漏掉。革兰染色本身只有五步,...
细胞活率突然掉、上清发浑、乳酸飙升,第一反应常是“污染了”。别急着扔罐。搅拌剪切、气泡破裂、微载体碰撞都能造成类似结果。本文从低级错误到放大参数,把排查路径、具体数值和验证动作讲透。你照着做,大概率能...
切了一夜,SDS-PAGE一看,前体带还在,酶带都快没了。这种崩溃我见过太多次。你加了酶,控了温,等了16小时,结果跟没切一样。问题大概率不在酶本身,而在用量算错、缓冲液不兼容、位点被埋住这三件事上。...
测序回来了,覆盖度图上一片窟窿,重复率飙到40%,Q30还凑合但有效数据少得可怜。你第一反应是不是"送样公司坑我"?先别急着找人背锅。测序深度不足和文库复杂度低,八成出在你自己手上的那几步。这篇教程按...
做发酵最气人的事,不是染菌,是溶氧曲线一路下滑贴到零,菌体浓度卡在OD600 15死活不涨。你加大通气,没用;你把转速拉满,还是零。问题往往不在"供氧不够"这四个字上,而藏在装液量、补料策略、比生长速...
做克隆想消除内部酶切位点,结果PCR没条带、酶切切不开、测序全是原模板。你可能在设计引物时就埋了雷。沉默突变要改碱基却不改氨基酸,还要恰好破坏酶切位点。这篇教程从引物设计、PCR扩增、DpnI消化到转...
做转染最怕第二天早上看板子——昨天还铺得均匀的细胞,今天一半飘了、贴壁的也缩成一团。十有八九,问题出在脂质体用量上。毒性高不一定是脂质体"有毒",更可能是用量、比例、孵育条件某一环踩了线。下面按"先排...
细胞养着养着状态就崩,PCR一测支原体阳性。加了两周抗生素,看着转阴,停药一周又亮灯。这大概是细胞房里最让人上头的事。别急着扔细胞,也别急着换药。下面按"先查低级错、再拆流程、最后啃硬骨头"的顺序,把...
做厌氧发酵,最让人抓狂的不是不产气,而是"产一点又不多"。瓶子看着有气泡,气相色谱一测,甲烷只有理论值的两成。你换了菌、调了温度、加了底物,产气还是上不去。这时候,八成问题出在你最不当回事的地方——培...
峰拖尾最烦人。方法跑得通,峰却像背了个小尾巴,定量积分一塌糊涂。你换柱子、换流动相、调pH,折腾一天,有时问题就在柱温。这篇教程按“快排低级错误→系统查流程→进阶疑难”走,把柱温怎么影响拖尾、怎么判断...
柱压突然从0.3 MPa跳到1.0 MPa,泵开始报警,流速掉了一半,目标峰还没影子。别急着拆柱。层析柱压力升高,九成是填料间隙被堵住,但堵在哪儿、堵了什么,决定了你冲一冲就能救回来,还是只能重新装柱...