来源:细胞支原体污染清除抗生素(DNA Lab Space 实验教程)| 编译:DNA Lab Space
细胞养着养着状态就崩,PCR一测支原体阳性。加了两周抗生素,看着转阴,停药一周又亮灯。这大概是细胞房里最让人上头的事。别急着扔细胞,也别急着换药。下面按"先查低级错、再拆流程、最后啃硬骨头"的顺序,把药物选择、浓度、处理周期、检测方法、环境交叉污染全部过一遍。照着做,你能定位到具体哪一步在漏水。
第一步:别急,先看这4个低级错误


1. 药选错了。 支原体没有细胞壁,青霉素、链霉素、氨苄西林这类β-内酰胺类全无效。解决:换作用在核酸或蛋白合成的药,四环素类(BM-Cyclin A)、喹诺酮类(Plasmocin成分)、大环内酯类都行。
2. 忘了换液补药。 Plasmocin在培养基里半衰期只有约12-24小时,你隔3天换一次液,后两天等于没加药。解决:每24-48小时换新鲜含药培养基。
3. 细胞太密。 汇合度超过70%时加抗生素,细胞先死给你看,支原体躲在细胞缝里