是不是每次满怀期待地剥开凝胶,看到的却是弥散到亲妈都不认识的条带、笑成月牙的泳道,或者干脆空白得让你怀疑自己加了个寂寞?SDS-PAGE 作为蛋白实验的“童子功”,折腾人的功力一点不输高级仪器。今天这...
做过TA克隆、Gibson组装前的T4连接过渡,或者传统酶切连接的都知道——**连接这一步,往往卡得最莫名其妙**。明明载体切干净了、片段回收浓度也不低,转化后平板就是“白花花一片不长菌”或者“全蓝斑...
色氨酸2-单加氧酶(TMO)能够催化L-色氨酸转化为重要的植物生长调节剂吲哚-3-乙酰胺,但天然酶的热稳定性极差,严重制约其工业应用。传统酶工程改造常陷于规模庞大的实验筛选泥潭,而对TMO的稳定性设计...
面对日益严峻的气候变化,人工固碳途径的设计与优化成为合成生物学的研究热点。其中,乙醇酰辅酶A羧化酶(glycolyl-CoA carboxylase, GCC)是羟基丙酸/羟基丁酸循环等新型固碳通路的...
芳香族聚酮化合物(aromatic polyketides)是一类结构复杂、药理活性卓越的天然产物,临床上广泛用作抗生素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂等。然而,其传统生产方式受限于天然宿主生长缓慢、产量低下...
天然产物及其衍生物一直是创新药物与高值化学品的重要源泉,但其复杂结构常使化学全合成步履维艰,而天然宿主的低产与难培养特性又大大限制了其开发。近年来,合成生物学的蓬勃发展为天然产物的异源重构与结构创新提...
DNA片段的可控翻转与重排是合成生物学构建动态遗传回路与蛋白质多样性的核心技术。近期,Katalinić 等人在《ACS Synthetic Biology》发表的一项研究中,系统探索并拓展了一类名为...
化学交换饱和转移(CEST)磁共振成像技术凭借其独特的分子对比机制,在非侵入性代谢与微环境检测领域展现出巨大潜力。然而,传统CEST探针的设计受限于化学合成的复杂性与信号灵敏度的不足。最新的研究突破性...
做克隆最怕的不是没菌落,而是板子上白花花一片,跑个菌落PCR全是空载体,甚至直接“秃板”——一个菌都不长。恼火的是,明明照着说明书做了3:1的插入片段和载体,怎么还是这样?其实,
你是不是也有过这种经历:满怀期待打开凝胶成像仪,结果眼前一黑,泳道干净得像刚拖过的地板,除了 marker 啥也没有。管你做了多少遍,该没条带还是没条带。别急着骂试剂,今天这篇就是?