📖 实验教程

做Western Blot最崩溃的瞬间，不是条带不亮，而是目的条带清晰可辨，但整张膜像涂了墨水——背景高到曝光仪里一片雪白，连预染Marker都看不清。更气人的是，换了昂贵封闭液、延长封闭时间，背景纹...

做发酵最怕什么？不是染菌，不是设备跳闸，而是你明明按配方加了料，菌体却跟你装死——OD600停在1.5不上不下，产物滴度低得想摔瓶子。更气人的是，问了一圈人，答案都是“碳氮比有问题”，可具体怎么调、怎...

做亲和层析纯化，最后检测内毒素超标，这是不是比蛋白不纯更让你崩溃？前面的纯化流程跑了十几个小时，结果全毁在去内毒素这一步。内毒素带正电、耐高温、还会形成聚集体，想用常规方法除掉它，往往蛋白损失比内毒素...

提取完核酸，Nanodrop一测，A260/A280不到1.8，A260/A230甚至跌到0.5，跑胶还有拖尾和孔内大分子残留——磁珠法提核酸，纯度崩了怎么办？别急着换试剂盒，多数问题出在操作细节和体...

做发酵工艺开发的人，最怕的不是菌种不争气，而是在线监测数据突然“说谎”。明明罐里菌体长得正欢，副产物检测值却忽高忽低，甚至出现负值；或者葡萄糖、乙酸、乳酸、乙醇这些关键参数在线读数总跟离线化验对不上，...

做纳米抗体表达，最让人崩溃的莫过于：菌体涨得挺好，诱导也做了，结果裂解上清里目标蛋白少得可怜，包涵体里倒是“硕果累累”。你换了低温、降IPTG浓度、改了培养基，可溶性还是上不去。问题很可能出在你选的融...

做CRISPR实验，最扎心的不是转染失败，而是电转后阳性率低得可怜，测序峰图一片乱码，或者单克隆长出来全是野生型。你翻遍protocol，转染效率明明没问题，那十有八九是gRNA设计埋了雷。本文从最基...

做甲醛变性胶RNA电泳，最怕的不是没有条带，而是辛辛苦苦跑出来的胶上糊成一片、条带拖尾、连18S/28S都分不清。你以为是RNA降解了，其实可能是缓冲液配错、甲醛pH不对、电压太高，甚至上样量太多。本...

提RNA提得想哭，跑胶一看全是smear，RIN值6.0以下——是不是只能扔掉重新提？别急，降解样本不等于报废。关键要搞清楚三个问题：降解发生在哪个环节？降解到什么程度？用哪种挽救流程能最大程度回收信...

养细胞最怕“明明什么都换了，细胞就是不长”。尤其当你排查过pH、污染、血清批次后，细胞依然半死不活，这时候十有八九是渗透压出了问题。别急着怀疑人生，这篇教程从最基础的低级错误开始，一步步带你分模块排查...

做微生物发酵最怕什么？不是菌长得慢，而是泡沫突然像火山爆发一样涌上来，你一慌，赶紧补消泡剂，结果泡没压下去，菌却先不行了，要么代谢变慢，要么干脆溶氧跌零。更头疼的是，同一个发酵罐，上次加这个量没事，这...

做胶回收最崩溃的瞬间，不是条带不亮，而是切胶后回收浓度低得可怜，或者干脆什么都洗脱不下来。明明目的条带很清晰，电泳图上亮堂堂的，一测浓度却是几 ng/μL，连接转化直接泡汤。更恼火的是，这种问题往往没...