📖 实验教程

抽完DNA，你满心欢喜上NanoDrop。A260/280只有1.5，或者A260/230不到1.0。扔了可惜，用了心虚。这种痛每个做分子实验的都懂。别急着判死刑。比值异常不等于DNA全废。本文从低级...

你从-80°C拿出甘油菌，划了平板，37°C过夜。第二天一看，平板上冒出两种菌落。别急着扔管子。甘油菌污染可能发生在冻存前、冻存中、复苏时，甚至平板本身。本文按实验流程拆解，从低级错误到进阶疑难，给你...

导语：蓝白斑筛选本该蓝白分明，结果挑出来的白斑摇菌后全是空载体或没插入片段——假阳性能把人逼疯。别急，90%的问题出在平板、感受态和连接体系上。下面从低级错误到进阶疑难，一步步带你定位。

酵母转化不长斑，真的让人头大。你明明按 protocol 走了，阳性对照却一片白。别急着丢质粒。问题可能出在感受态、DNA、热激、恢复、筛选任何一环。这篇教程覆盖 LiAc/PEG 化学法和电转法，从...

跑了一整天胶，结果条带拖尾、鬼影、分子量对不上。这心情我懂。别急着把样品扔了重做，八成不是蛋白本身的问题。这篇按你手上的

细胞养着养着就慢？换液、传代都正常，就是不长。你可能把血清灭活了太久。血清灭活本为56°C 30分钟，但温度漂移、时间拉长会干掉生长因子。本文从快速排错到进阶疑难，给你完整排查路径。覆盖灭活条件、血清...

跑胶跑了几百次，marker一歪心就凉。条带拖尾、弯曲、多带、消失，多半不是marker本身坏了，而是胶、缓冲液、电压、上样哪个环节出了岔子。本文按从低级到进阶的顺序，把每类异常对应的现象、原理、动手...

你收了包涵体，8 M尿素溶了，稀释复性过夜，第二天一离心——上清里没东西，全在沉淀里。更气人的是：上清有蛋白，活性只剩理论值的2%。复性效率低不是玄学。绝大多数问题出在溶解不彻底、起始浓度过高、氧化还...

跑完胶，条带亮得晃眼，回收完一测，浓度只有 15 ng/µL。接下来的连接、转化全卡在这儿。这种"看得见收不着"的崩溃，九成不是试剂盒坏了。这篇按实验流程从头捋，从切胶到洗脱，每个原因给你现象、原理、...

跑完胶一看，目标条带没影，10–40 bp位置却糊了一团亮斑；NTC（无模板对照）也照样出带。先别怀疑模板和酶，八成是引物自己跟自己抱上了。二聚体和发夹是引物设计里最阴的两类二级结构，肉眼看不出来，软...

摇瓶发酵最怕什么？不是表达量低，是染菌。凌晨三点守着摇床，早上起来一看，培养基浑了、pH飙了、闻到一股酸臭味——几天的心血全废。染菌排查难在"找不到入口"，因为你面对的是一个已经污染的结果，而污染可能...

同一株DH5α，别人转化pUC19长几百个克隆，你只长几个？CaCl2法看着简单，坑全在细节。菌液OD、离心温度、CaCl2预冷、热激秒表、复苏时间，任何一步跑偏，效率可能从10^8掉到10^5。下面...