📖 实验教程

发酵罐pH漂移最烦人：灭菌前校准正常，灭菌后偏0.3，补料泵一开又跳0.5。你反复做pH 4.00/6.86双点校准，斜率看着也过，罐内数值还是不可信。别急着调零点，也别靠补酸补碱硬压。下面按“低级错...

条带糊成一片，跑成笑脸，或者拖出一条长尾巴。核酸胶跑成这样，十有八九不是手法问题。别急着换试剂盒。弥散的根源通常藏在电压梯度和产热里。这篇教程按“样品—制胶—上样—电泳—设备”五段拆开，把电压、缓冲液...

透析袋一打开，里面白花花一片。上清没剩多少，收率直接腰斩。这种痛，做过蛋白纯化的人都懂。沉淀不一定是蛋白坏了，大概率是缓冲液离子强度、pH或操作节奏出了问题。本文按透析前、缓冲液配方、透析操作、透析后...

补料泵在转，残糖却掉到0，DO猛地反弹，乙酸两小时冲到6 g/L——碳源耗尽反馈控制翻车，发酵后期最容易崩。别急着改PID。先看泵管、电极、补料液，再拆反馈信号、控制逻辑和代谢抑制。下面按操作链给参数...

乳酸越积越多，pH一路往下掉，自动补碱却开始震荡、过冲，甚至把菌“碱伤”了。你看到的可能不是pH电极坏了，而是反馈链路、补碱策略和产物抑制一起在捣乱。本文按“先排低级错、再拆流程、后看疑难”的顺序，把...

挑了几十个克隆，跑完凝胶一看，孔里干干净净。阳性对照有带，样品全空。是克隆不带插入片段，还是模板根本没裂开？这两种情况在胶图上长得一模一样，慌也没用。菌落PCR的假阴性里，一半以上出在模板预处理和裂解...

前体补加是最“反直觉”的一步操作：加少了没效果，加早了拖垮菌体，加多了直接抑制生长，补加后产物反而掉。很多人卡在“知道要补、不知道什么时候补多少”。这篇从快速排查到进阶疑难，按发酵流程拆开讲，每个问题...

做毕赤酵母分泌表达，SDS-PAGE跑出来常常是一条弥散的大拖带，比理论分子量高10-30 kDa，WB上像"梯子"；PNGase F处理后又缩回单一条带。糖型不均、高甘露糖化几乎是最常见的"隐身故障...

qPCR扩增曲线歪、Ct偏晚、NTC也起峰，十有八九撞上引物二聚体。别急着换酶、换模板，先看低级错误。本文按配液前处理、引物与体系、程序与荧光采集3步拆解，给你现象判断、具体参数和验证动作，SYBR ...

qPCR跑完，扩增曲线拖尾、NTC起峰、熔解曲线多出一个小峰——大概率是引物二聚体在捣乱。别急着换试剂。先看NTC，再看引物浓度和退火温度。本文按“快速排低级错→分模块查体系/引物/程序/数据→进阶疑...

养细胞的人都懂那种心慌。早上打开孵箱，昨天还樱红的培养基今天紫得发黑，或者酸成金黄。细胞没污染，计数也没错，问题大概率出在缓冲体系上。碳酸氢钠换HEPES、HEPES换MOPS，参数差一点，pH就跟你...

上周还是24小时一代，这周48小时铺不满一瓶。镜下细胞摊得又大又扁，胞质颗粒多，边缘不规整——这不是你的错觉，是细胞在给你发信号。传代老化、倍增时间延长，大概率不是单一原因，而是消化、密度、血清、环境...