来源：发酵罐灭菌后溶氧零点校准（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space
灭菌后DO零点校不准，发酵一晚上pH和溶氧曲线全乱。你遇到过吗？刚灭完罐，加亚硫酸钠，DO降到8%就卡住。或者零点校准显示-2%，接种后溶氧一直负值。别急着换电极。问题大概率在灭菌操作、电解液、温度补偿和校准顺序上。本文按“快速低级错误→分模块系统排查→进阶疑难”三层，把灭菌后零点校准的坑一次讲透。覆盖极谱式和原电池式电极，给具体浓度、温度和时间。
第一步：快速排查低级错误
1. 没换电解液就灭菌。现象：零点电流>10 nA，校准后漂。解决：灭菌前换膜，加满电解液，拧紧。
2. 极化时间不够。现象：零点读数为负，持续下降。解决：灭菌前在缓冲液中极化30 min，原电池式过夜。
3. 用自来水配亚硫酸钠。现象：DO降不到0。解决：用去离子水配饱和亚硫酸钠（25°C约26 g/100 mL），加0.01% CoCl2。
4. 校准顺序反了。现象：零点准了斜率不准。解决：先零点，再空气饱和水100%。
