来源:蛋白定量偏差Bradford(DNA Lab Space 实验教程)| 编译:DNA Lab Space
同一管裂解液,昨天测2.1 µg/µL,今天变1.3 µg/µL。标准曲线R²=0.998,样品值却忽高忽低。WB上样量跟着乱,条带越来越不齐。别急着怀疑蛋白降解。Bradford偏差大概率藏在缓冲液、标准品、加样、读板这几个环节。本文按实验流程拆开讲:先扫低级错误,再分模块查样本、标准、操作、仪器、线性范围,最后处理膜蛋白、还原剂、低丰度样品。给你能直接照做的动作链。
第一步:快速排查低级错误


- 波长设错?Bradford读A595 nm,不是