来源：细胞转染效率低DNA纯度（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space
转染效率低，荧光稀稀拉拉，细胞死一片。你换试剂、调密度，还是老样子？大概率是DNA纯度拖后腿。别急着换试剂。本文按流程拆解：质粒提取、内毒素、盐残留、细胞状态、转染操作、检测时间，再给进阶疑难和避坑清单。照着做，一次把变量锁死。
第一步：快速排查低级错误
- 浓度测了但没看比值。Nanodrop A260/A280低于1.7，蛋白污染，重提。
- 转染时细胞太密。汇合度超过90%，DNA进不去，控制在70-80%。
- DNA和脂质体比例随手加。6孔板1-2 μg DNA配2-4 μL Lipofectamine 2000，别凭感觉。
- 复合物孵育超时。室温15-20 min，超过30 min开始聚沉。
第二步：分维度系统排查
1. 质粒纯度与质量
蛋白/酚/乙醇残留
现象：转染24 h GFP阳性<10%，细胞大量死亡。原理：残留物破坏脂质体