细胞凋亡率高血清饥饿同步

来源:细胞凋亡率高血清饥饿同步(DNA Lab Space 实验教程)| 编译:DNA Lab Space

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做细胞周期同步,血清饥饿是成本最低的一招。可镜下飘一层,Annexin V一测阳性率30%以上,后面所有实验全废。问题多半不在"凋亡"本身,而在饥饿浓度、时长、铺板密度和检测环节。下面按先查低级错误、再按流程拆解、最后处理疑难的顺序走一遍。每一步都给判断标准、验证动作和具体参数。照着做,多数人当天就能把凋亡率压回10%以内。

第一步:先看这4个新手最常犯的低级错误

教程配图2:细胞凋亡率高血清饥饿同步 排查流程示意
▲ 教程配图2:细胞凋亡率高血清饥饿同步 排查流程示意
教程配图3:细胞凋亡率高血清饥饿同步 排查流程示意
▲ 教程配图3:细胞凋亡率高血清饥饿同步 排查流程示意

1. 血清浓度一步降到0%。多数贴壁细胞系撑不住完全无血清,24小时就大批凋亡。改成0.1%–0.5%

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