来源：生物反应器通气不足KLa（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space
发酵罐DO掉到0，通气开到2 vvm还是不起泡？别急着换大罐。KLa低，多半是气液传质被卡住。本文覆盖气路查漏、搅拌分散、培养基粘度、消泡剂、罐压和动态法测定，给你可落地的排查动作。直接看，先别加气。
第一步：快速排查低级错误
1. 空气过滤器装反或堵了？现象：进气压力表0.1 MPa，罐内无泡。解决：拆下0.22 μm滤芯，测前后压差>0.05 MPa就换，按箭头装。
2. 通气针阀没开？现象：流量计浮子0。解决：先开总阀，再调转子到0.5-1 vvm，听罐底有连续气泡声。
3. 搅拌忘了开？现象：DO随通气略升但很快掉。解决：设200-300 rpm起步，再按工艺升到600 rpm。
4. pH/DO探头没校准？现象：DO显示25%，细胞不长。解决：用无氧水（0.1 g亚硫酸钠+水）和空气两点校准，搅拌150 rpm稳定5分钟。
第二步：分维度系统排查
1. 气路与供气模块。现象：通气量旋钮拧到最大，流量计仍低于0.3 vvm。原理：管路漏气或滤芯压降大，实际入罐气量不足。解决步骤：①关罐底进气阀，保压0.05 MPa，涂肥皂水查接头，冒泡就拧紧或换硅胶管；②拆滤芯测压差，>0.05 MPa换新；③检查尾气冷凝器是否积水，排掉。验证方法：罐内装水，通气1 vvm，用排水集气法测1分钟出气体积，偏差>10%就是气路问题。先查气路，这步别省。
2. 搅拌与气泡分散。现象：通气1 vvm，DO仍<20%，气泡大且上升快。原理：KLa随搅拌转速和表观气速增加，但桨型不对，气泡没被剪碎。解决步骤：①确认用Rushton或斜叶桨，底层桨离罐底0.3-0.5倍桨径；②转速从200 rpm逐步升到600-800 rpm，每档稳定5分钟看DO；③若DO随转速明显升，说明KLa受搅拌控制。验证方法：动态法测KLa，关气后DO从100%降到20%所用时间，KLa=ln(100/20)/t，若<20 h⁻¹，先升转速。测一下，数值不会骗人。
3. 培养基物性与泡沫。现象：高密度发酵后期，粘度像糖浆，气泡聚并成大泡。原理：粘度升高降低氧扩散，蛋白/多糖稳定泡沫，气液界面被占。解决步骤：①补料策略调整，葡萄糖浓度控在5-10 g/L，避免积累；②消泡剂用硅油或聚醚，先稀释10倍，每次补0.01-0.05% v/v，别一次加多；③提高罐压到0.2-0.