来源：生物反应器溶氧电极漂移校准（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space
发酵到一半，DO读数从40%直接滑到0；或者灭菌后零点怎么都压不下去。这类问题九成不是电极坏了，是校准和操作细节里埋的坑。下面从最低级的电解液、接线错误，一直讲到灭菌后漂移、搅拌依赖、压力效应，把整条排查路径拆成可执行的动作，参数给具体值，你照着做就行。
第一步：先查最容易犯的低级错误
1. 电解液干了或膜下带气泡。拧开电极帽，液面应离膜2-3 mm，缺了补0.1 mol/L KCl。补完用手指弹电极侧壁，把气泡弹到膜外——气泡压在阴极面上，零点一定飘。
2. 膜没拧紧或装歪。O型圈要压平，膜面绷紧无褶皱。立起来迎着光看，有凹陷、褶皱直接换膜，一张膜几块钱，别省。
3. 极化时间不够。极谱电极接上变送器要极化，新换膜至少极化30分钟，稳妥做法是接上过夜。极化不足的典型表现：读数一路向上爬，10分钟能爬5%。
4. 温度探头没插或通道配错。核对变送器显示温度等于罐温。差2°C，满度误差就有4%-6%。
第二步：分维度系统排查
按流程拆成四段来看，问题基本落在这里面。
1. 零点校准这一段。 饱和亚硫酸钠是标配：10 g无水Na₂SO₃溶于100 mL去离子水，现配现用，放两天就被空气氧化失效。电极浸进去，读数应稳定在0.1%-0.5%空气饱和度，2分钟不动才算过。零点压不下去，先看溶液是否失效——发浑、闻不到还原味就重配；再看膜是否被蛋白残留污染，污染会让透氧率下降，零点看着"偏高"。验证办法：换新膜新电解液，重新极化2小时再测，零点还高就是Ag/AgCl参比老化，换电极。
2. 满度校准这一段。 别拿自来水糊弄。满度要用跟发酵液同盐度的培养基，通气加搅拌至少20分钟达平衡，再把当前值定为100%。纯水校准后用于含盐培养基，读数系统性偏高，5 g/L NaCl就差约3%。饱和浓度随温度走：25°C约8.3 mg/L，30°C约7.6 mg/L，37°C约6.7 mg/L。温度填错一位数，整条DO曲线都是假的。
3. 搅拌与通气依赖这一段。 极谱电极自身耗氧，读数跟膜表面液膜厚度直接挂钩。