发酵泡沫溢出消泡剂抑制生长

来源:发酵泡沫溢出消泡剂抑制生长(DNA Lab Space 实验教程)| 编译:DNA Lab Space

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发酵罐泡沫顶到排气口,你手一抖加了消泡剂,结果OD600不涨、耗糖停、DO反弹。别急着倒罐。泡沫和消泡剂常互相背锅。本文覆盖大肠杆菌、酵母、丝状真菌发酵,从低级操作、培养基与工艺、消泡剂种类/浓度/添加方式,到高密度发酵进阶坑,给你能直接上手的排查路径和具体参数。

第一步:快速排查低级错误

1. 消泡剂加太多。现象是加完立刻生长停。马上取样测OD600,若比0 h下降或持平,用0.22 μm过滤的无消泡剂培养基稀释5-10倍,或直接换罐。

2. 消泡剂灭菌方式错。现象是发酵液浑浊、pH漂移、镜检杂菌。有机硅消泡剂121°C 20 min可能破乳,改用过滤除菌或原位灭菌型;豆油需121°C 20 min。

3. 泡沫溢出后没降通气搅拌。现象是泡沫继续涨,你还继续加消泡剂。先降搅拌到200 rpm、通气0.5 vvm,停补料10-15 min,等泡沫回落。

4. 取样口或消泡剂瓶口污染。现象是局部染菌。75%乙醇擦拭瓶口,火焰灼烧取样口,换新消泡剂分装。

教程配图2:发酵泡沫溢出消泡剂抑制生长 排查流程示意
▲ 教程配图2:发酵泡沫溢出消泡剂抑制生长 排查流程示意

第二步:分维度系统排查

按流程走:泡沫产生→消泡剂选择→添加→发酵参数→菌体响应。

1. 泡沫产生原因没找对。

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