📖 实验教程

转染效率低，细胞死一片，GFP荧光稀稀拉拉？别急着换脂质体。大概率是复合比例、操作细节或细胞状态出了问题。本文从低级错误到进阶疑难，按实验流程拆解脂质体复合比例相关的排查路径。每一步给现象、原理、解决...

做细胞培养最崩溃的时刻之一：配方照抄、称量准确，高压灭菌完一看——培养基浑了，瓶底还躺着絮状沉淀。倒掉重配？几十块钱的试剂和时间全打水漂。更要命的是，你可能连哪一步出错都不知道，下次照犯。这篇教程从低...

送测回来，峰图打开一看，好几个位置双峰叠在一起，像心电图乱跳。你第一反应是测序公司的问题？别急着打电话。套峰的原因可能在你这边：模板不纯、PCR非特异、引物错配、甚至挑克隆时挑到了两个菌。这篇教程按实...

双酶切验证本该是构建流程里最省心的一步，结果胶图一跑出来，条带全乱。切不开、切不全、切出杂带，条带大小对不上，甚至泳道里一片弥散。你怀疑酶失活、怀疑连接出错，最后发现可能只是质粒浓度测错了。本文按“低...

挑板没菌、菌落全是空载体、测序总在接头处断掉，这三个场景你大概率都遇到过。问题经常不在插入片段，而在载体线性化。本文按无缝克隆实际流程，从酶切、PCR线性化、DpnI处理、同源臂、摩尔比、重组反应到转...

摇瓶转发酵罐，最让人抓狂的不是不长，是"看着在长，其实在瞎长"。DO掉到0，pH从7一路滑到5.8，OD卡在8不动，补碱补到手酸。你怀疑菌种、怀疑培养基、怀疑配方。大概率都不是。溶氧和pH这两个参数是...

"做了三条sgRNA，T7E1胶上一条切割带都没有。"这大概是CRISPR新手最常见的一句话。敲除效率低，八成不是Cas9不行，而是sgRNA设计或者检测环节出了岔子。别急着换试剂盒，也别急着重做。这...

做融合蛋白纯化，最让人血压升高的一幕：SDS-PAGE跑完，诱导前一条带、诱导后一条带、洗脱下来还是一条带——酶切完，还是那一条带。你加了酶，也孵育了，过夜了，第二天胶上啥也没变。到底是酶失活、缓冲液...

涂板过夜，平板干干净净？阳性对照也没菌？别急着怀疑质粒。转化失败多数不是玄学，而是某一步参数漂了。本文按转化流程拆成三步：先扫低级错误，再分模块查质粒、感受态、热激、复苏和涂板，最后处理毒性基因、电转...

跑完胶，打开紫外灯，心里咯噔一下——条带不是锐利的带子，而是一坨拖尾的弥散云。样本珍贵，时间耗了，结果却没法用。DNA弥散在琼脂糖电泳里太常见了，从样品制备到电泳条件，任何一个环节出问题都可能让它发生...

跑完WB，ECL压片一片空白。Marker亮了，目标没亮。或者连Marker都没转过去。这种时刻最抓狂。别急着扔膜，也别立刻换抗体。本文按实验顺序，从样本制备、电泳转膜、封闭孵育到显影，给你一套可操作...

抽完DNA，你满心欢喜上NanoDrop。A260/280只有1.5，或者A260/230不到1.0。扔了可惜，用了心虚。这种痛每个做分子实验的都懂。别急着判死刑。比值异常不等于DNA全废。本文从低级...