细胞支原体污染PCR假阴性

来源：细胞支原体污染PCR假阴性（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space

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细胞支原体PCR跑出一条干净泳道，不代表细胞真的干净。假阴性最坑人：污染还在，传代、转染、收蛋白全受影响。这篇按取样、提取、扩增、判读四条线拆开，给你能直接照做的排查动作，也补上低载量和抑制物的进阶处理。

第一步：快速排查低级错误

1. 只取上清不取细胞。支原体黏在细胞膜上，换液后上清载量可能掉到检出限以下；解决：弃旧培养基，PBS洗1次，加1 mL PBS刮下细胞，再混2 mL原培养上清，13,000×g