📖 实验教程

PCR跑完胶，目标带旁边多出几条杂带，或者整条泳道弥散拖尾。你第一反应是调退火温度。可降温

刚接种6小时，菌没长，pH先飙到7.8，镜检看到杂菌。批号报废。别急着调pH。迟滞期pH异常常是染菌、电极、灭菌、接种操作共同作怪。本文按流程拆成三步：先查低级错误，再分维度系统排查，末尾处理疑难。每...

做大肠杆菌分泌表达，最气人的不是没表达，是胞内能看到条带、周质和上清里死活捞不着。或者信号肽切不动，蛋白泡在膜上。你换过PelB、试过OmpA，产量还是上不去。问题大概率不在蛋白本身，而在信号肽和宿主...

交联做了三遍，WB上就是看不到高分子量条带。单体没少，复合物没出，背景倒是一堆。这种时候别急着换抗体或者怀疑互作不存在——大概率是弱交联剂没有工作，或者工作得太极端。弱交联（low-stringenc...

做固定化酶，最怕什么？游离酶测活时好好的，一固定到载体上，活力直接掉到10%以下。你以为是酶坏了？大概率不是。载体交联这一步，从活化到封闭，每一步都能让酶“半死不活”。今天这篇教程，把载体交联导致活力...

你辛辛苦苦修饰完电极，CV扫出来峰电流跟裸电极差不多，EIS半圆直径没变化，加目标物后电流掉不下去——别急着换材料。八成是电极修饰的某个环节掉了链子。这篇教程按"往下挖"的顺序，从低级错误到进阶疑难，...

分选跑了两个小时，目标细胞才收了几千个。喷嘴压力报警响了三次，液流歪了，断点飘了。你盯着屏幕骂了一句，然后开始怀疑人生。别急着拆喷嘴。90%的"堵塞"其实不堵。本文按"先低级后高级"的顺序，把样品制备...

做10x单细胞，最怕上机后空滴率>95%，细胞却没几个。油压一跳，液滴就乱。别急着换芯片。这篇把油路、芯片、流速、温度、细胞悬液全串起来，给你可照做的排查动作链，附具体压力和验证方法。

做酵母表面展示，流式图上信号比背景还低？别急着换载体。你大概率不是一个人。从pYD1到pCTCON2，从EBY100到酿酒酵母，表面展示表达量低的原因能排成一串。这篇教程按实验流程拆成三步：先扫低级错...

做CFPS最怕什么？模板加了，提取物换了，GFP对照明明亮，你的目的蛋白就是不出量。别急着怀疑核糖体。多数时候，问题卡在ATP/GTP供给、再生系统、Mg²⁺和副产物上。本文从新手低级错误到能量模块、...

做代谢工程，最烦的不是没产量，而是副产物像打地鼠：敲了ldhA，乙酸上来；补敲pta-ackA，乙醇又冒头。多靶点叠加后，电转没菌、平板上全是假阳性、PCR条带忽大忽小。别急着怀疑菌株。这篇按转化、筛...

样品跑完，图谱上本该干净的单峰裂成两个尖，甚至拖成"骆驼峰"。你第一反应是换根毛细管，但十有八九问题不在管子，而在缓冲液体系。峰分叉的根子通常有三类：缓冲液pH或浓度不对、离子强度与样品不匹配、缓冲液...