📖 实验教程

分选前数着10^6个细胞，分选后只收到2×10^5。回收率不到30%，你盯着收集管怀疑人生。别急着怪仪器。流式分选回收率低，八成问题出在样本、液路和收集端。这篇教程覆盖从样本制备到分选后计数的完整链条...

做包涵体复性，你满怀期待地上样，结果分子排阻层析柱里直接飘出白色絮状物，或者A280图谱上聚集体峰高耸入云，单体峰小得可怜。回收率不到10%，柱子还堵了。别急着怀疑人生，大概率是几个关键参数没控住。本...

跑完Protein A，收率只有三成？洗脱峰拖尾、拖到半夜？产物一中和就浑浊？抗体纯化里，洗脱pH这一步最容易翻车。往下看，从低级错误到进阶疑难，按流程拆开讲。你照着查，大概率能定位到问题。

跑胶跑到一半，紫外灯下一看——样品条带清清楚楚，Marker 却像被橡皮擦蹭过，拖尾、弥散、甚至整条 lane 雾蒙蒙一片。这种情况十有八九不是你的样品出问题，而是 Marker 本身、电泳系统或者成...

跑脱盐柱最怕什么？不是蛋白丢了，是峰拖尾——目标峰和盐峰咬在一起，收也不是，不收也不是。拖尾的原因可能简单到上样体积超了，也可能复杂到填料跟你的蛋白有弱吸附。别急着换柱子，也别急着怀疑自己的纯化手艺。...

挑10个克隆，跑胶全是空载？或者条带若有若无，测序一塌糊涂。别急着扔板子。菌落PCR翻车，七成出在引物，三成毁在操作。今天从引物设计到菌液处理，把每个坑给你刨出来，附具体温度、体积和验证动作。看完照着...

银染灵敏度高，脾气也大。背景一深，条带像掉进墨汁；你拿脱色液一泡，背景没干净，条带先没了。别急着扔胶。本文按“低级错误—流程模块—进阶疑难”拆开讲，覆盖固定、敏化、银染、显色、终止、脱色和器皿水质，给...

跑完 SDS-PAGE，诱导泳道和未诱导泳道一模一样——没条带、没变粗、没变淡。这时候多数人会去改 IPTG 浓度，或者干脆换个载体重做。别急，温度和时机才是重灾区。16°C 过夜看着温和，实际可能给...

细胞养着养着，培养瓶里的酚红从橙红变紫红，细胞开始圆缩、贴壁变差。你换完液第二天一看，又紫了。烦。其实培养基pH漂移绝大多数不是细胞出了问题，而是缓冲体系跟培养环境没匹配上。这篇教程把配液、储存、CO...

你设了D=0.15 h⁻¹，OD600却从3.2掉到1.1。产物浓度跟着坐滑梯。别急着怀疑菌株。连续流发酵的稳态，大概率毁在泵管、液位和取样这三个地方。本文按“低级错误→系统排查→进阶疑难”走一遍。覆...

做CRISPR的都有一个噩梦：花了三周养细胞、跑PCR、送测序，结果一打开比对文件——脱靶位点比目标位点还热闹。这不是运气差，大概率是某个环节出了系统性问题。下面从sgRNA设计到最终检测，把每一步的...

细胞养得好好的，一支PCR下去，阴性对照也亮条带——这时候你心里大概已经凉了半截。支原体检测的假阳性最磨人：它不像污染那么直观，条带出来了你却不敢信，杀一轮、传几代、再测，还是模棱两可。这篇把常见原因...