📖 实验教程

同一株菌，上一批平板上的菌落圆整光滑、边缘利落，这一批却冒出粗糙型、边缘锯齿、大小不齐，有的还发黏发干。你以为是污染，重新划线还是这样；你以为是菌种退化，换了新冻存管，传两代又回去了。菌落形态变异这事...

发酵做到20小时，pH和DO都还正常，唯独甘油消耗曲线平了——这是克雷伯氏菌、大肠杆菌或酵母甘油发酵里最让人心里一沉的一幕。停料？继续补？很多新手第一反应是加大补料速率，结果甘油越积越多，代谢彻底走偏...

培养基配好第二天瓶底一层白霜，过滤后又冒絮状物，细胞长得还行但心里没底——这大概是每个做细胞的人都会遇到的糟心事。沉淀到底是钙磷、碳酸钙、铁盐，还是氨基酸结晶？是配方问题还是操作问题？本文按配液流程拆...

做离子交换最崩溃的瞬间，不是蛋白不挂柱——是挂了，也洗下来了，但UV吸收峰糊成一坨。两个峰肩并肩，收集管里一测，A蛋白里混着B蛋白，纯度卡在70%上不去。本文按“样品前处理→柱效→梯度设计→检测收集”...

挑好插入片段、跑完 PCR、切胶回收，把载体和目的基因放在一起过夜连接，转化后第二天平板上一看——就 3 个克隆，还全都是自连的背景。这种落差用一次就能让人冷静下来。连接效率低从来不是单一原因，载体去...

做毕赤酵母的都有这个经历：摇瓶里菌长得挺猛，转BMMY加甲醇诱导，72小时取样跑SDS-PAGE，目标条带淡得几乎看不见。你把甲醇浓度加了、温度降了、时间延长了，还是没起色。大概率被忽略的是pH。本文...

诱导完跑一管SDS-PAGE，目标条带在沉淀里又粗又黑，上清干净得像没诱导过。你换了共伴侣质粒、降到16°C、连宿主都换了，沉淀里那条带愣是不动。问题多半不在“要不要加伴侣”，而在伴侣加得对不对、时机...

跑蛋白纯度HPLC，主峰一拖尾，纯度报告就不好看，方法转移也容易被卡。别急着换柱子。峰拖尾可能来自样品、流动相、柱温、管路，也可能只是积分参数。本文按“先排低级错误，再按流程拆模块，最后看疑难”的顺序...

接头连完了，磁珠纯化也做了，结果下一轮PCR起不来、Bioanalyzer上多个莫名其妙的峰、Qubit读数比qPCR高一大截——这类“看不见的脏东西”，十有八九是磁珠或它带来的盐和PEG。这篇按建库...

跑完Edman降解，色谱图上PTH峰矮得像基线噪声？样品明明有，信号就是起不来。别急着怀疑仪器。N端测序信号弱，大概率卡在样品量、膜固定、偶联裂解或萃取回收这几步。这篇教程按实验流程拆开讲：先排低级错...

发酵罐OD突然往下掉，溶氧十分钟内从30%飙到80%，pH自己往上走，泡沫发黄还带碎片。你第一反应是染菌？别急着倒罐。这很可能是噬菌体爆发，也可能是灭菌、接种、取样口或空气系统某一环漏了。下面按“低级...

发酵罐一开，乙酸、乳酸、乙醇全冒出来，目标产物却卡在低点。你是不是也遇到过：摇瓶看着正常，上罐48小时副产物翻倍；或者诱导后OD涨得挺好，产物就是不动。副产物积累本质是碳代谢流“跑偏”了，从培养基、供...