📖 实验教程

同一个样本，Qubit读数一会儿380 ng/μL，一会儿610 ng/μL；稀释10倍再测，按理该是38，结果算出65。你怀疑样本降解，其实大概率是荧光染料饱和了。核酸定量的坑，八成不在样本，在体系...

发酵罐里酸度曲线漂亮，一上原位萃取就翻车：两相分不开、界面糊成粥、回收率卡在30%，严重时菌体第二天全沉。别急着换溶剂。先把取样、pH、相比这些基础项捋直，再按发酵端、相平衡、传质、破乳四条线排查。下...

跑完胶一看，条带像被橡皮擦蹭过。Marker也歪，目的带拖尾。别急着重新PCR。核酸电泳条带模糊，大概率在凝胶浓度、缓冲液、电压和上样量这四个环节。下面按“3分钟快查—分模块系统排查—进阶疑难”走一遍...

洗脱峰一歪，收集管就难合并。 purity 掉、yield 也掉。别急着换柱子。峰不对称大概率藏在样品、柱效、梯度延迟和收集窗口里。本文按实验流程拆开讲：先排低级错误，再查样品与缓冲液、装柱质量、梯度...

发酵液加乙酸乙酯，1:1 混匀、涡旋 30 秒、静置半小时——底下是水相，上面是溶剂相，中间夹着一层白花花的“奶盖”，怎么都不动。这不只是难看。产物被包裹在界面层，回收率掉三成是常有的事。别急着往瓶里...

RNA提取最让人头疼的不是提不出来，而是提出来一看——28S带糊成一片，A260/280只有1.6，跑胶全是拖尾。你换了新试剂盒、泡了DEPC水，降解还是在。问题往往不在"DEPC有没有用"，而在你用...

提质粒、跑酶切，本该是条带锐利的单一条带，结果胶上一片拖尾弥散，从孔往下糊成一片。是不是降解了？还是酶切没切开？别急着把整管质粒扔了。弥散的原因从菌体裂解一直藏到电泳上样，涉及至少七八个环节。这篇按“...

补料批发酵最怕pH像坐过山车：补料一开，pH往下冲；碱泵一加，又冲过头。产酸波动不是单一参数的问题，往往从电极、补料、控制回路一路串到代谢。下面按“先排低级错，再按流程拆，再处理疑难”走一遍，给你能直...

做碱基编辑最让人难受的不是编不出来，是你明明看见Sanger峰上有一小撮杂峰，NGS一跑，编辑效率2.7%。脱氨酶融合体系（BE3/BE4/ABE）失败的原因，八成不在"CRISPR不灵"，而在融合蛋...

上机跑了半小时，FSC-A/FSC-H 图上斜着拉出一条线，或者干脆冒出个双峰。第一反应是加大涡旋？先停一下。过度涡旋会把细胞打碎、把 DNA 放出来，越旋越粘。这篇从解离、离心、重悬浓度，到涡旋档位...

发酵罐上OUR曲线突然掉一半，或者尾气O2读数比进气还高——这种时候先别怀疑菌株。八成是通气速率和尾气流量这条链路上出了问题。尾气分析的所有计算都建立在“进气流量”和“排气流量”两个数上，任何一个偏了...

扩增曲线漂亮，Ct值也正常，一点开熔解曲线——两个峰。更糟的是NTC孔也出峰了。你开始怀疑引物，怀疑模板，怀疑人生。别急着重新设计引物，双峰大概率和引物有关，但不一定是引物序列的错。这篇按“看对照→查...