发酵泡沫溢出消泡剂抑制生长

来源:发酵泡沫溢出消泡剂抑制生长(DNA Lab Space 实验教程)| 编译:DNA Lab Space

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泡沫冲罐已经够糟,更糟的是一瓢消泡剂下去,泡没了,菌也不长了。发酵中后期泡沫溢出常和补料、通气、搅拌一起失控;消泡剂抑制生长又常被误判成染菌或培养基问题。下面按“先查手误,再查消泡剂种类、浓度、时机、灭菌,最后看工艺和菌体状态”的路径,给你能直接照着做的动作和验证指标。

第一步:快速排查低级错误

1. 消泡剂没单独灭菌,或和培养基一起121°C、20 min后分层。解决:消泡剂115°C、15 min单独灭菌,降到60°C以下再补加;发现油水分层直接换新。

2. 加量凭手感,一次倒到“看不见泡”。解决:先按终浓度0.05%试,硅油类别超0.2%,聚醚类别超0.5%,用10%稀释液滴加。

3. 泡沫一顶就停搅拌,随后又猛开。解决:先把搅拌降20%、通气降到0.5 vvm,补料限速,别关搅拌。

4. 消泡剂和酸碱、高盐补料共用一条管路。解决:单独管路,加完用纯水冲5 min,避免局部浓度过高。

教程配图2:发酵泡沫溢出消泡剂抑制生长 排查流程示意
▲ 教程配图2:发酵泡沫溢出消泡剂抑制生长 排查流程示意

第二步:分维度系统排查

1. 消泡剂种类和菌体耐受

现象:加完0.2%硅油,2 h内泡沫消了,OD600不涨,耗糖速率掉一半

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