来源：细胞培养基沉淀析出钙磷盐分步添加（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space
开篇导语
配好的DMEM放一晚就发雾，0.22 μm滤膜越滤越堵，瓶底还有细小白点。细胞养着养着贴壁变差，你怀疑污染，其实大概率是钙磷盐析出。这篇按“快速排错—分维度排查—进阶疑难”讲透，重点教你用分步添加把钙盐和磷酸盐拆开处理，配液、过滤、储存一次做稳。
第一步：快速排查低级错误
- 钙盐和磷酸盐在同一支量筒里高浓度相遇，刚加完就乳白；解决：分开容器溶解，别把100×钙母液和100×磷母液直接对倒。
- 配液水或瓶子残留Ca²⁺、PO₄³⁻，空白瓶也出白点；解决：用18.2 MΩ·cm超纯水，玻璃瓶酸洗后冲3遍，或直接用新无菌瓶。
- pH调过头，pH>7.6后越搅越浑；解决：用1 M HCl/NaOH逐滴调，目标室温7.2-7.4，搅拌5 min再测。
- 过滤后4°C放一夜析出，误当污染；解决：配好当天过滤分装，用前37°C水浴15 min观察，仍浑浊就弃用。
第二步：分维度系统排查
1. 钙盐与磷酸盐局部过浓
- 现象：加磷酸盐母液时局部起白雾，0.22 μm滤膜10 min内堵。
- 原理：Ca²⁺与HPO₄²⁻/PO₄³⁻局部过饱和，快速生成磷酸钙微晶。
- 解决：按配方称CaCl₂·2H₂O和NaH₂PO₄·2H₂O，各自用100 mL超纯水配成100×母液，分别0.22 μm过滤。终体积1 L时，先把磷酸盐母液