📖 实验教程

做毛细管电泳，最怕看到本该尖锐的峰变成“前边拖个尾巴”的斜坡——峰型前伸，又叫前沿峰（fronting peak）。你以为是样品浓度太高？其实很多时候是缓冲液、进样量甚至毛细管内壁处理的问题。新手容易...

做分子克隆最怕的不是没条带，而是条带“糊成一团”——明明质粒提出来了，酶切后跑胶却是一片弥散或拖尾，让人分不清是质粒有问题、酶切没切好，还是胶本身出了问题。很多新手第一反应是“酶失效了”，换酶重切，结...

做克隆最怕什么？不是提质粒，不是转化，而是酶切切不动、连接连不上，最后胶图上只有一条淡淡的条带，或者转化后一个克隆都没有。更气人的是，你换了酶、换了片段、换了连接酶，还是老样子。其实绝大多数酶切连接失...

养了半个月的细胞，好不容易转染成功，一上流式分选仪，堵针了。液流断断续续，分选效率掉到零，你手忙脚乱地反冲、换喷嘴、调液流，最后只能关机收细胞——这种滋味，做过分选的人都懂。聚团堵针是流式分选最常见的...

明明细胞状态看起来还行，PCR却跑出多条杂带或者干脆没条带；荧光染色看着像污染又像假阳性——支原体污染检测这个“隐形杀手”，最折磨人的不是结果阳性，而是结果不可信。本文从新手最易犯的低级错误，到分模块...

做Ni-NTA纯化最怕看到什么？不是没蛋白，而是洗脱峰宽得像个土丘，前拖后拖，还要用好几个试管接，最后浓缩跑胶一看，杂蛋白和目的蛋白混在一起，收率低、纯度也差。你说闹心不闹心。别急，洗脱峰展宽不是玄学...

做纯化的同行都懂，填料用久了总要再生。但最让人窝火的就是——明明按 SOP 再生了，结果柱效不仅没恢复，反而比再生前还差，HETP 疯狂飙高，峰形拖尾严重。这期教程就专门来撕开这个“再生后遗症”的锅，...

做流式分选最崩溃的瞬间，不是你设门设到眼花，而是明明上样了10万个细胞，分选完一数，回收率不到30%。更气人的是，仪器参数看着全正常，样本也没问题，可细胞就是“人间蒸发”了。别急着怀疑人生，回收率低这...

做杂交瘤实验，最怕的不是没结果，而是费尽心思融合、筛选，最后拿到一堆不分泌抗体或者分泌了却失活的克隆。细胞不生长、阳性率低、抗体特异性差，每一个坑都让人头疼。更麻烦的是，这些问题往往不是单一原因造成的...

做克隆最崩溃的瞬间，莫过于从-80℃冰箱里掏出一管感受态，冰上融化后加质粒热激，涂板过夜，第二天一看——空白得刺眼。转化率从10⁸掉到10⁴甚至零，这种“冻融后失灵”的怪病，新手遇到十有八九直接怀疑质...

辛辛苦苦做了密码子优化，合成新基因，转进去一看——表达量比野生型还低了30%甚至更多。是不是很崩溃？别急着怀疑人生，这个问题在实验室里太常见了。密码子优化不是简单的“换成高频密码子”，它牵涉到mRNA...

做聚羟基脂肪酸酯（PHA）的兄弟姊妹们，是不是经常遇到这种情况：菌长得很肥，摇瓶里pH也降了，但最后离心收菌体一称，PHA干重不到细胞干重的30%，甚至只有10%？更气人的是，重复三次结果还能差出一倍...