📖 实验教程
化学法制备感受态效率低CaCl2
做转化实验最怕什么？辛辛苦苦提的质粒，涂板过夜后一看，一个单克隆都没有，或者稀稀拉拉长出几个卫星菌落。如果你是新手，第一反应往往是“质粒是不是有问题？”但更多时候，问题恰恰出在感受态制备这一步。CaC...
Western Blot无信号排查方法
开箱一支抗体大几千，熬夜跑胶转膜一整天，最后压片一片空白——Western Blot无信号，几乎所有分子生物学人都经历过这种绝望。更崩溃的是，你根本不知道问题出在一抗、二抗、转膜还是显影，只能像无头苍...
SDS-PAGE条带异常原因分析
辛辛苦苦提完蛋白，配胶、上样、转膜一气呵成，结果显出来却是“鬼脸条带”、“鼻涕拖尾”、或者干脆白板一片，有没有瞬间想连电泳槽一起扔出去的冲动？别急，90%的SDS-PAGE条带异常都不是玄学，而是有明...
限制酶切不完全星号活性
你是不是也遇到过——电泳胶上明明该出的条带没出来，不该出的杂带倒糊成一片？或者双酶切做完，回收的片段大小怎么都对不上，重新做三次还是老样子？这锅八成要甩给“限制酶切不完全”和“星号活性”。本篇教程不拽...
SDS-PAGE条带异常原因
是不是每次满怀期待地剥开凝胶，看到的却是弥散到亲妈都不认识的条带、笑成月牙的泳道，或者干脆空白得让你怀疑自己加了个寂寞？SDS-PAGE 作为蛋白实验的“童子功”，折腾人的功力一点不输高级仪器。今天这...
T4连接酶效率低摩尔比
做过TA克隆、Gibson组装前的T4连接过渡，或者传统酶切连接的都知道——**连接这一步，往往卡得最莫名其妙**。明明载体切干净了、片段回收浓度也不低，转化后平板就是“白花花一片不长菌”或者“全蓝斑...
Protein and peptide engineering for CEST imaging in the age of Synthetic Biology
化学交换饱和转移（CEST）磁共振成像技术凭借其独特的分子对比机制，在非侵入性代谢与微环境检测领域展现出巨大潜力。然而，传统CEST探针的设计受限于化学合成的复杂性与信号灵敏度的不足。最新的研究突破性...
Enhancement of tryptophan 2-monooxygenase thermostability by semi-rational enzyme engineering: a str
色氨酸2-单加氧酶（TMO）能够催化L-色氨酸转化为重要的植物生长调节剂吲哚-3-乙酰胺，但天然酶的热稳定性极差，严重制约其工业应用。传统酶工程改造常陷于规模庞大的实验筛选泥潭，而对TMO的稳定性设计...
Machine Learning-Supported Enzyme Engineering toward Improved CO2-Fixation of Glycolyl-CoA Carboxyla
面对日益严峻的气候变化，人工固碳途径的设计与优化成为合成生物学的研究热点。其中，乙醇酰辅酶A羧化酶（glycolyl-CoA carboxylase, GCC）是羟基丙酸/羟基丁酸循环等新型固碳通路的...
Metabolic Engineering and Synthetic Biology Approaches for the Heterologous Production of Aromatic P
芳香族聚酮化合物（aromatic polyketides）是一类结构复杂、药理活性卓越的天然产物，临床上广泛用作抗生素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂等。然而，其传统生产方式受限于天然宿主生长缓慢、产量低下...
Protein engineering for natural product biosynthesis and synthetic biology applications.
天然产物及其衍生物一直是创新药物与高值化学品的重要源泉，但其复杂结构常使化学全合成步履维艰，而天然宿主的低产与难培养特性又大大限制了其开发。近年来，合成生物学的蓬勃发展为天然产物的异源重构与结构创新提...
Do the Shuffle: Expanding the Synthetic Biology Toolkit for Shufflon-like Recombination Systems
DNA片段的可控翻转与重排是合成生物学构建动态遗传回路与蛋白质多样性的核心技术。近期，Katalinić 等人在《ACS Synthetic Biology》发表的一项研究中，系统探索并拓展了一类名为...