📖 实验教程

质粒切完了，跑胶看到亮带，纯化后测浓度也挺好，可一连接转化，平板上就稀稀拉拉几个克隆。这种问题你多半遇到过。别急着换连接酶，也别立刻怀疑感受态——大概率是酶切产物本身在拖后腿。这篇教程按“低级错误→系...

冻存一批细胞，复苏后活率一路从90%跌到30%，换培养基、换血清都不管用——你大概率是栽在DMSO浓度上了。DMSO是冻存液里的核心保护剂，浓度高了细胞直接中毒，浓度低了冰晶照样戳穿膜。这篇教程直接从...

做CRISPR实验，最扎心的不是转染失败，而是电转后阳性率低得可怜，测序峰图一片乱码，或者单克隆长出来全是野生型。你翻遍protocol，转染效率明明没问题，那十有八九是gRNA设计埋了雷。本文从最基...

做纳米抗体表达，最让人崩溃的莫过于：菌体涨得挺好，诱导也做了，结果裂解上清里目标蛋白少得可怜，包涵体里倒是“硕果累累”。你换了低温、降IPTG浓度、改了培养基，可溶性还是上不去。问题很可能出在你选的融...

做甲醛变性胶RNA电泳，最怕的不是没有条带，而是辛辛苦苦跑出来的胶上糊成一片、条带拖尾、连18S/28S都分不清。你以为是RNA降解了，其实可能是缓冲液配错、甲醛pH不对、电压太高，甚至上样量太多。本...

养细胞最怕“明明什么都换了，细胞就是不长”。尤其当你排查过pH、污染、血清批次后，细胞依然半死不活，这时候十有八九是渗透压出了问题。别急着怀疑人生，这篇教程从最基础的低级错误开始，一步步带你分模块排查...

提RNA提得想哭，跑胶一看全是smear，RIN值6.0以下——是不是只能扔掉重新提？别急，降解样本不等于报废。关键要搞清楚三个问题：降解发生在哪个环节？降解到什么程度？用哪种挽救流程能最大程度回收信...

CRISPR实验做到脱靶验证，反而比编辑本身更让人头秃：好不容易拿到细胞，建库、测序、分析一条龙下来，结果却是没信号、背景高、或者突变频率对不上。你开始怀疑人生——到底是我敲除没成功，还是脱靶验证方法...

PCR跑完，胶上一片“满天星”——目的条带弱得像个影子，杂带倒是亮得扎眼。你是不是第一反应就是“退火温度太低”？于是把温度从55℃一路加到65℃，结果杂带还在，目的带反而没了？别急着调机器，杂带多≠退...

做划痕实验最崩溃的不是细胞不迁移，而是明明趋势都对，Image J算出来的面积变化却乱七八糟，或者同一组数据重复三次结果差异大到没法看。划痕图像分析看着简单，其实从划痕制备到参数设定，任何一步手抖都会...

摇菌摇了16个小时，菌液浑浊得像牛奶，结果质粒大提后一测浓度只有20 ng/μL——这种“努力全白费”的崩溃，几乎每个分子生物学家都经历过。其实质粒大提产量低，八成都不是试剂盒的锅，而是从菌株选择到菌...

脱盐是蛋白纯化里最“看着简单、做好不容易”的一步。你花半小时上样洗脱，结果目标峰拖出一条长长的尾巴，盐峰和蛋白峰糊在一起，样品被稀释了一大截——这种事我见过太多次。别急着换柱子，这套排查方案从柱子选型...