蛋白层析脱盐峰拖尾柱选择

来源：DNA Lab Space 实验教程 | 编译：DNA Lab Space

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脱盐是蛋白纯化里最“看着简单、做好不容易”的一步。你花半小时上样洗脱，结果目标峰拖出一条长长的尾巴，盐峰和蛋白峰糊在一起，样品被稀释了一大截——这种事我见过太多次。别急着换柱子，这套排查方案从柱子选型、装柱质量、上样量、流速到缓冲液条件，把拖尾原因逐个拆清楚，照着查就行。

第一步：快速排查低级错误

很多拖尾根本不是玄学，而是基础操作没到位。先检查这几条：

• 上样量超过柱体积的1/3。 脱盐柱的上样体积是硬指标：一根10 mL柱子上样超过3 mL，峰宽直接翻倍，拖尾必然出现。解决：按柱体积的20%-30%上样，宁可少上多次。
• 柱子没平衡到位。 只用1-2倍柱体积的缓冲液冲完就上样，柱床局部pH或盐浓度不匀