来源：发酵OUR异常供氧限制（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space
发酵罐上的DO曲线一夜贴到0，OUR从80 mmol/L/h掉到30，你第一反应是不是“菌不行了”？大概率不是。供氧限制最麻烦的地方在于，仪表、硬件、培养基、菌体生理这四层都能造出假象，你盯着DO百分比猜三天也猜不出结论。这篇教程给一条当天就能上手的排查路径：先扫低级错误，再拆四个模块，最后处理疑难情况。5 L罐到2000 L罐都适用。
第一步：快速排查低级错误
1. DO电极在灭菌前校准。 121°C、20分钟灭完菌，零点漂移5–15%，你把“仪表低”当成了“供氧差”。解决：灭菌后接种前重标一次，饱和空气（37°C）做满度，5% Na₂SO₃做零点。
2. 通气量单位看错。 转子流量计标L/min，配方写vvm，5 L罐装液3 L、0.5 vvm是1.5 L/min，不是5 L/min。解决：按实际装液量折算后，把数字写在流量计旁边。
3. 消泡剂加太猛。 硅油型消泡剂100 ppm就能把kLa砍掉20–40%。解决：改成流加，0.1 mL/min，累计浓度压在20–50 ppm。
4. 罐压或密封圈漏气。 取样口、补料口的O型圈老化，罐压掉到0.02 MPa以下，C*直接少一截。解决：闷罐保压0.05 MPa、30分钟，压降超0.005 MPa就换圈。
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