质粒提取拷贝数低菌株培养条件

来源：质粒提取拷贝数低菌株培养条件（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space

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做低拷贝质粒提取，浓度总在20–50 ng/μL打转？菌液看着浑，产量却上不去。问题常不在柱子，而在菌株培养条件。这篇按“先排低级错、再按流程查、再看疑难”的路径，覆盖活化、培养基、抗生素、接种量、通气、温度时间和收获裂解，给出可落地参数与验证动作。低拷贝菌株别照搬高拷贝流程。你照单执行，能把“菌没长好”和“质粒没复制”分开。

第一步：快速排查低级错误

1. 甘油管直接接种？别急。从−80°C甘油管划线LB琼脂（含对应抗生素），37°C培养14–16 h，挑单克隆接3 mL