来源：细胞交叉污染STR鉴定排查（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space
细胞养着养着，STR图谱多出几个峰。数据库一比对，匹配度只有60%。你懵了：是污染，还是样本搞错？别急着扔细胞。这篇教程把细胞交叉污染导致的STR鉴定异常拆成三步：先查低级错误，再按培养、提取、PCR、电泳、分析逐段排查，最后讲几个容易误判的进阶坑。每个原因都给判断、验证和解决动作。照着做，大概率能锁定问题。
第一步：快速排查低级错误（别让小失误背锅）
1. 样本标签对不上？ 冻存管、培养瓶、PCR管三处编号必须一致。解决：翻冻存记录，双人核对，重新取样跑一次。
2. DNA浓度太低或太高？ Qubit读数低于0.5 ng/µL或高于20 ng/µL，峰容易塌或出杂峰。解决：稀释到1-2 ng/µL，NanoDrop A260/280控制在1.8-2.0。
3. PCR漏加组分？ 没加酶、引物或模板，图谱空白或只剩LIZ峰。解决：新配Master Mix，设阳性对照，检查-20°C试剂是否反复冻融。
4. 电泳板位错？ 上样顺序和板图不一致，A样本读成B样本。解决：重排96孔板图，加ladder定位，重跑一次。
第二步：分维度系统排查（从培养到数据分析）
1. 培养操作交叉污染
现象：同一次传代的多株细胞STR相同，或主峰旁带低峰。
原理：移液枪、培养基、胰酶共用，细胞气溶胶进入另一瓶。
解决：每株细胞专用培养基分装。0.25%胰酶1 mL/25 cm²，37°C消化1-2分钟。