📖 实验教程

你盯着WB结果眉头紧锁——体外敲除效率明明>90%的单克隆细胞株，种到小鼠皮下三周，取瘤后检测靶蛋白表达居然回来了。这不是个例。CRISPR编辑细胞株在体内成瘤后出现逃逸，比你想象的更常见。可能是原始...

辛苦纯化出的包涵体蛋白，复性后收率不足10%，或者出现大量沉淀，又或者条带是对的但活性检测就是不过——这种挫败感，做过的人都懂。有没有一种可能：问题不在你表达的蛋白，而在你把包涵体"打开"和"重新折叠...

光照均质问题，是微藻培养里最隐蔽的“慢性病”。你可能已经试过加大光强、延长光照时间，藻却依旧长得稀稀拉拉，甚至干脆贴壁发黄。原因往往不在“光够不够”，而在“光到了没、每颗藻细胞分到的是多少”。这篇文章...

做分选时最怕什么？液流延迟设错，细胞全偏到废液桶里。你以为设了补偿就万事大吉，结果微球校准峰就是歪的。别急着骂仪器。大概率是几个低级错误在拖后腿。这篇教程带你从零排查，覆盖微球准备、液流稳定、延迟计算...

你做质谱前酶解，到底折腾过多久？明明跑了无数遍PNGase F的protocol，N糖位点占用率就是不稳定，低得没法看。问题多半不在质谱，而是酶解上游的系统性偏差。本文覆盖去糖基化、蛋白酶切、肽段回收...

做细胞代谢组学，最怕的不是信号弱，而是样本处理完了，数据根本没法解释。淬灭那一步，细胞膜一旦破损，胞内代谢物直接泄进淬灭液里。你测到的“胞内含量”，实际是细胞漏完剩下的残渣。本文从低级错误开始，逐步拆...

你的蛋白条带切下来、酶解过夜、质谱上机，结果鉴定到的肽段覆盖度低得可怜。Mascot或MaxQuant搜库结果里一串烷基化修饰的肽段峰值消失，半胱氨酸残基上该有的Carbamidomethyl（Cys...

质粒连接做了，转化也涂了，第二天满怀期待开培养箱——结果满板子蓝斑，白斑一个都没有。或者更崩溃的：白斑倒是不少，质粒提出来一酶切，全是空载体。这种状况我见过太多次，耽误三到五天是起步价。

复性步骤不难，但每次结果都像开盲盒——沉淀、活性低、一锅浑汤。别急着怀疑蛋白本身，大概率是你复性液里的添加剂出了问题。本文从低级错误到进阶疑难，带你逐层拆解，照着排查，今天就能解决你的问题。

你用的是Superdex 200 Increase，10 mm内径的柱子，平衡了两遍，UV基线也平了。结果样品一上去，峰拖成个"彗星尾巴"，柱压从0.3 MPa一路飙到0.8 MPa。这画面是不是很眼...

做宏基因组测序，最怕什么？不是提取的核酸量不够，而是满怀期待上机，结果80%的reads都来自宿主。宿主DNA残留，直接把你目标微生物的信号稀释成背景噪音。你反复优化，试了各种试剂盒，问题还是老样子。...

发酵罐里酵母OD掉得比预期快，镜检视野里全是碎片，上清颜色发深发浑。你补了氮源，结果不但没救回来，反而溶氧更差、pH掉得更狠。这不是个例。菌体自溶牵一发动全身，氮源补加策略搞不对，整批发酵直接报废。本...