📖 实验教程

悬浮细胞慢病毒转导，效率一直上不去。你试过Polybrene，试过RetroNectin，甚至换过几种电荷助剂，结果还是能用的细胞系还好，换成Jurkat、THP-1、Ramos这类悬浮细胞，阳性率直...

制备好的感受态细胞，一管下去连个单克隆都没有；或者长出来的菌落稀稀拉拉，远低于预期。你检查过质粒浓度，没问题；感受态也是现做现用，不至于全废。那问题出在哪？大概率是热激这一步或者缓冲液体系出了问题。别...

新手看条带，老手看分布。单细胞转录组文库扩增，最怕的不是“没产物”，而是“产物有了，数据全偏”。PCR循环数一多，稀有基因被稀释，高表达基因占据绝对优势——这叫扩增偏倚。你花了大半天分选细胞、建库，最...

你的 Co-IP 结果又花了。目的条带旁边永远黏着几条甩不掉的「影子带」，跑出来丑得不想存图，更别提写论文。你换了抗体、重煮了样本，结果它还在那儿。别急着怪一抗，大概率是封闭和洗涤的细节没卡死。

跑甲醛变性胶，本指望看到完整漂亮的RNA条带或DNA条带，结果却是弥散一片、条带消失，甚至整孔发亮？这种挫败感太熟悉了。明明核酸提取时浓度和纯度都正常，怎么一跑胶就崩了？

做荧光素酶报告基因实验，最怕的就是阴性对照孔亮得像阳性。你调低曝光、缩短积分时间，背景还是压不下去，数据根本不敢用。别急着怪试剂——大概率是你某个操作环节埋了雷。这篇教程带你从最基础的错误开始，一路查...

做蛋白纯化，最烦的不是没挂上柱，而是洗脱峰拖到天荒地老，载量一提就穿透。你加班换了新填料，结果还是老样子，问题可能根本不在填料。这篇文章从低级错误、系统排查到进阶陷阱，帮你把洗脱峰拖尾和载量上不去的根...

发酵罐上的pH电极，最近是不是又让你头疼了？明明上周刚校过，这周灭菌完再测，斜率掉到90%以下，零点的mV值飘得离谱。校准周期从两周缩到一周，再缩到三天，最后还是被迫换电极。别急着下单买新的，问题大概...

你盯着测序报告里的比对率掉到70%，或者非靶位点reads数高得离谱，心里大概在想：这是sgRNA设计的问题，还是建库流程翻了车？别急着重做实验，CRISPR文库筛选的扩增子测序脱靶，大概率绕不开PC...

转化大片段DNA和转质粒完全是两码事。小质粒丢了就丢了，重连一个克隆很快，但BAC、Cosmid这类上百kb的大家伙，每多操作一步，分子断裂、细胞损伤、电击失败的风险都成倍累积。你很可能经历过：质粒对...

外源蛋白在毕赤酵母里表达得好好的，一收菌跑蛋白胶却只剩降解条带。诱导时间越久，目标条带越淡，杂带越来越多。你调过甲醇浓度、试过不同pH，结果依旧。别急着换载体，也别怀疑密码子。大概率问题出在蛋白酶降解...

你盯着测序峰图，目标位点的C没变，可旁边的C却莫名其妙变成了T。或者更糟——编辑窗口倒是挺准，但效率低到怀疑人生。碱基编辑器的脱氨酶窗口调控，就是这么个让人头秃的环节。窗口太宽怕脱靶，窗口太窄怕没效果...