📖 实验教程

你遇到过这种情况吗？目的蛋白纯化到一半，溶液突然变白，离心后一堆沉淀。上清里浓度低得可怜，活性也丢了。大多数人第一反应是“加保护剂”。别急。先排查问题出在哪个环节，再动手筛选不迟。本文覆盖从裂解到储存...

养细胞最怕什么？不是污染，不是培养基变黄，而是明明密度还没到80%，凋亡却先来了。尤其当你把谷氨酰胺换成替代物后，细胞突然变得“娇气”——只要长密一点，就成片飘起来。别急着换回原配方，大概率是替代策略...

辛辛苦苦提了核酸，过柱纯化也做了，结果qPCR上机却显示抑制率高得离谱，扩增曲线乱成一团。你换了一整盒试剂，甚至怀疑自己的枪法——问题大概率不在你的手上，而在那些看不见的抑制物残留。这篇教程按实验流程...

冻存一批细胞，复苏后一看，死了一片。活下来的也是萎靡不振，贴壁半天没动静。你查了培养基、血清、培养箱，都没问题。那大概率是冻存和复苏的某个环节出了岔子。这篇文章不绕弯子，直接从你手上最可能的低级错误开...

搅拌桨一转，菌就死给你看。pH、溶氧、温度全正常，可活菌数就是上不去。你调低转速，溶氧又不够了；调高转速，菌体直接破裂。发酵罐里的剪切力，看不见但致命。这篇教程就干一件事：帮你把“转速—剪切力—菌体损...

拿到一份酶切结果，胶图上一片模糊，条带位置不对，或者干脆只有一条超螺旋带。别急着怀疑人生。大概率不是你的质粒有问题，而是反应体系里某个环节出了岔子。这篇教程从酶切失败最常见的“低级错误”一路排查到让人...

你有没有遇到过这种情况：目的蛋白理论分子量 35 kDa，跑出来的条带却愣愣地停在 50 kDa 甚至更高的位置，marker 对得整整齐齐，就是你自己的样品歪了。第一反应是蛋白降解？突变？分泌修饰？...

做核酸提取最扎心的时刻，不是没提出来，而是提出来了——跑胶一看，是个弥散条带。或者没有主带，或者大片段区域一片空白，基因组DNA全碎成了200 bp的小段。你辛辛苦苦处理的组织、细胞，就这么毁了。

做微生物发酵，前体补充就像给反应堆加燃料——加早了，菌体还没进入生产期，前体被当碳源消耗掉；加晚了，产物合成路径断粮，产量断崖式下跌。更麻烦的是，很多前体还有毒性抑制，补加时机差半小时，结果天差地别。...

养细胞最烦什么？明明昨天还好好的，今天一开培养箱，培养基变紫红色，细胞飘了。或者pH看着正常，但转染效率突然崩盘。你换新鲜培养基、换血清，折腾一圈还是老样子。大概率不是操作问题，是缓冲体系扛不住了。这...

发酵最怕的不是产量低，而是半夜收到徒弟消息："罐子变清了，pH自己往上跑。"你心里一沉——大概率是噬菌体来了。别慌，这篇教程带你从低级错误到深层机制，把早期预警信号逐条拆透。覆盖染菌和噬菌体两类污染，...

菌落PCR出假阴性，最坑人。你挑的克隆明明在平板上长得好好的，PCR就是没条带，或者条带若隐若现。大多数人第一反应是换酶、换引物、换程序，折腾半天，问题其实出在最不起眼的步骤——模板预处理和裂解。这篇...