📖 实验教程

你跑了一下午梯度，主峰后面拖条长尾巴，收集管里全是稀稀拉拉的“废液”，蛋白纯度不过关，重复性也崩了。别急着怪柱子，脱尾这件事，九成有规律可循。本文从新手上路的低级错误，到盐梯度斜率的系统性排查，再到罕...

你盯着屏幕上的pH值从6.80慢慢飘到7.15，培养液颜色也变了。补碱泵频繁启动，DO曲线跟着抖动，整批发酵数据全乱了。pH电极漂移，是发酵罐最磨人的问题之一。校准液温度补偿没做对，更是新手重灾区。这...

养细胞最怕的不是长得慢，是培养基里飘起一层白色絮状物。肉眼可见的浑浊，镜下全是结晶，细胞在里头苟延残喘。你以为是培养基污染，过滤一遍照旧，换一瓶新批号还是不行，最后把血清、谷氨酰胺、抗生素全换了一遍，...

冻存一批细胞，复苏后存活率不到50%，甚至大片飘白。你大概率第一时间怀疑液氮罐出了问题，或者冻存液过期了。但真正的元凶，往往藏在那条你没画过的降温速率曲线里。这篇教程从低级错误开始，带你逐步拆解冻存复...

做无细胞表达最气人的事是什么？一管反应做下来，SDS-PAGE结果干干净净，目标条带跟蒸发了似的。你换了温度，加了镁离子，甚至把模板量翻了三倍，产量纹丝不动。

做酶切，最烦的不是没条带，而是条带比预期多。多出来的那条，位置不对，亮度还忽高忽低。你换了酶，换了缓冲液，结果还在。别急着怀疑酶失效，大概率是星号活性。而星号活性背后，最常见的推手是甘油浓度超标。

搅拌转速已经加到上限，溶氧还是拉不回来。你盯着DO曲线，心里明白：不是转速不够，是氧传递系数（KLa）掉了。但问题是——它为什么掉？你该先查哪？这篇文章给你一套直接能用的排查逻辑：先排除低级错误，再按...

提取好的基因组DNA跑完胶，Marker清清楚楚，你的样品却是一长串弥散涂带。大分子DNA全长两三分，电泳图上亮带全无，只剩smear。多数人第一反应是降解了，其实机械剪切力才是罪魁祸首。本文按“低级...

菌种丢进罐里，等了两小时没动静，pH没变化，OD值趴着不动。急不急？发酵罐每分钟都在耗电，你的排产计划在倒计时。更难受的是，你心里没底——这到底是菌种不行，还是接种量没给够？别急着重新摇瓶。这篇教程专...

发酵罐的KLa值掉了一半，溶氧值怎么补都上不去，菌体浓度卡在OD600=15再也涨不动。你检查了通气量、搅拌转速、温度、pH，全部正常。问题出在哪？大概率是挡板——这个罐内最简单却最容易被忽略的部件。...

培养基颜色变了，细胞不长了，实验又要重来。pH漂移是最隐蔽的始作俑者。你以为是细胞问题，其实是缓冲体系崩了。别急着换血清或重做细胞，先按下面步骤排查。覆盖HEPES配制、培养箱环境、操作细节和进阶疑难...

质粒酶切这步，卡住过多少人？你切了2小时，跑胶一看，要么一条带都没断，要么出现了四五个“幽灵条带”。该换的试剂换了，该查的protocol翻了，问题还在。更烦人的是，胶上的片段大小和预期完全对不上，你...